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乳粉中蛋白质的测定

乳制品检测

  • 乳粉中蛋白质的测定：

    依据：GB5009.5—2010

    我们采用国标中的第一法：凯氏定氮法

    实验原理：食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或烟酸标准滴定溶液滴定，根据酸消耗量诚意换算系数，即为蛋白质的含量。


    所需要的试剂：

    1.硫酸：密度为1.84L

    2.硫酸铜

    3.硫酸钾

    4.硫酸标准滴定溶液：盐酸或硫酸标定溶液0.0500mol/L

    5.硼酸溶液：称取20g硼酸，加水溶解后并稀释至1000ml

    6.氢氧化钠：称取40g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100ml

    7.甲基红乙醇溶液：称取0.1g甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml

    8.亚甲基蓝乙醇溶液：称取0.1g亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml

    9.溴甲酚绿乙醇溶液：称取0.1g溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100ml

    10.混合指示剂：2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合，也可以1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液，临用时混合




    试样处理：

    1称取2g奶粉样品 + 0.2g硫酸铜 + 6g硫酸钾 → 于凯氏烧瓶中（为了防止药品和样品附着在凯氏烧瓶壁

    上，用硫酸纸包好在放入凯氏烧瓶中）




    2.将20ml硫酸缓慢加入到凯氏烧瓶中，将凯氏烧瓶以45°角斜体支到电炉上面，小心加热







    3.    待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力



    4.    并保持瓶内液体沸腾，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，继续加热0.5~1小时。




    5.    取下放冷

    6.放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水清洗凯氏烧瓶，洗液并入容量瓶，加水至刻度混匀备用。同时做空白试验






    测定：





    1.    按图装好定氮蒸馏装置，向水蒸汽发生器内装水至2/3处，加入数颗玻璃珠，加甲基红乙醇溶液数滴及毫升数密度为1.84L硫酸，以保持水呈酸性，加热煮沸水蒸汽发生器内的水并保持沸腾

    2.向接收瓶内加入10ml硼酸溶液及1~2滴混盒指示剂，并使冷凝管的下端插入页面下，根据试样中氮含量，准确吸取2.0ml~10ml试样处理液由小玻杯注入反应室，以10ml水洗涤小玻杯并使之流入反应室内，随后塞进棒状波塞，将10ml氢氧化钠带入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸馏10min后移动蒸馏液接收瓶，液面离开冷凝管下端，再蒸馏1min，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下蒸馏接收瓶。以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定至终点

    3.其中2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液指示剂，颜色由紫红色变为灰色，PH5.4。1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液指示剂，颜色由酒红变成绿色，PH5.1，同时做试剂空白。

    分析结果表述：
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  • yinapple

    第1楼2011/12/18

    楼主的步骤很详细呀
    不错！！
    我们在用凯氏定氮瓶消解的时候在瓶口放一个小漏斗
    可以有效的促使硫酸蒸汽冷凝回流
    能减少损失

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  • 该帖子已被版主-木 子加5积分，加2经验;加分理由:感谢您的参与，欢迎您常来乳版交流~
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  • 木 子

    第2楼2011/12/18

    嗯，明天去加一个小漏斗，谢谢这位版友~

    yinapple(yinapple) 发表:楼主的步骤很详细呀
    不错！！
    我们在用凯氏定氮瓶消解的时候在瓶口放一个小漏斗
    可以有效的促使硫酸蒸汽冷凝回流
    能减少损失

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  • 天天洗碗

    第3楼2011/12/18

    不加漏斗，对检验结果影响不大吗？一直不加漏斗吗？

    木 子(plum) 发表:嗯，明天去加一个小漏斗，谢谢这位版友~

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  • 初学者&九点虎

    第4楼2011/12/18

    写的很好，不过希望楼主搞清以下几个问题
    1 硫酸的沸点
    2 添加催化剂的意义
    3 消解温度

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  • tangtang

    第5楼2011/12/18

    使用硫酸，不建议使用棉手套，起不到保护作用。

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  • xiaowang268

    第6楼2011/12/19

    很壮观啊，呵呵

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  • happy爱米粒

    第7楼2011/12/19

    楼主的实验室没有用凯氏定氮装置啊，呵呵，不过还是很经典方法，要做好也需要很多经验，楼主能多多分享下平时操作注意事项就好了

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  • hlm73

    第8楼2011/12/19

    请问有谁用定氮仪测试过没有，它的原理与装置与经典方法不同吗？

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  • ywangjie

    第9楼2011/12/19

    对的 ，要用防酸手套，加滤斗的时候应该是没有漏斗管的，防止液封而爆炸

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  • hirose77

    第10楼2011/12/19

    买个自动定氮仪吧，国产的也够用了

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