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液相手动进样 按定量环 按进样器 进样问题

  • jsyzcx19881208
    2011/12/22
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 硬件情况:日本分光JASCO 手动进样,有个20微升的定量环
    大致情况:以前老板自己做实验的时候,一直是10微升进样做的实验(按10微升进样器进样)
    现在我们做实验时存在这样一个问题,
    1.按她以前的10微升进样,建立一标曲A

    2.按定量环进样(用的是25微升的进样针,3针进去)PS:这里不知道与直接一个60微升一针进去的有什么区别?建标曲B
    出现的问题呢?
    我们同一个样品,10微升进样,按A算出来的浓度 与 20微升定量环(3针进)按标曲B算出来的浓度 存在2倍左右的关系,这怎么会呢?
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  • JS XY

    第1楼2011/12/22

    [quote]原文由 jsyzcx19881208(jsyzcx19881208) 发表:硬件情况:日本分光JASCO 手动进样,有个20微升的定量环
    大致情况:以前老板自己做实验的时候,一直是10微升进样做的实验(按10微升进样器进样)
    现在我们做实验时存在这样一个问题,
    1.按她以前的10微升进样,建立一标曲A

    2.按定量环进样(用的是25微升的进样针,3针进去)PS:这里不知道与直接一个60微升一针进去的有什么区别?建标曲B
    出现的问题呢?
    我们同一个样品,10微升进样,按A算出来的浓度 与 20微升定量环(3针进)按标曲B算出来的浓度 存在2倍左右的关系,这怎么会呢?
    计算问题吧?你计算时是不是用浓度算得,如果标准品和样品进样体积(如20ul)都一样,那么计算可以直接按浓度算就可以了。如果你标准品进20ul,样品进10ul,计算又只按浓度计算,结果就会是实际结果的一半。
    其实如果计算直接按进样绝对量计算就怎么算都不会错了。

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  • liufeilzu

    第2楼2011/12/22

    纵坐标换算成检测绝对量估计一样吧
    就是把坐标浓度改为g,mol的绝对量
    比如:老板做的
    浓度*体积(10ul)
    自己浓度*体积(20ul定量环)
    应该差不多
    记住检测器响应的是进去绝对物质量

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  • 老多_小多

    第3楼2011/12/22

    没兜清楚楼主的问题,以前进10微升,当然就是10微升的曲线,现在进20微升,当然就是20微升的曲线,你进多少体积就是套那个标准曲线呀,如果定量环是20,你进60当然进的还是20

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  • jsyzcx19881208

    第4楼2011/12/22

    我的意思是:同一个样品,我10微升进样,带进10微升所建标曲,计算得浓度A
    如果20微升进样,是带进20微升所建标曲,计算得浓度B
    B是A的2倍左右,这个问题!
    望各位前辈解惑!

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  • jsyzcx19881208

    第5楼2011/12/22

    牛人快出现啊!!!

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  • tangtang

    第6楼2011/12/22

    核对一下计算公式有没有错。

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  • yp314413

    第8楼2011/12/23

    你分析方法应该有验证吧,超出工作范围了测量就不准了

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  • 蓝人

    第9楼2011/12/23

    应助达人

    刚好两倍
    肯定是计算的问题
    晒下你的计算过程

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  • 江海一叶

    第10楼2011/12/23

    贴你的计算过程一目了然

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  • xuhua987

    第11楼2011/12/23

    有可能是超过了方法线性关系以外了

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