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大家做含量时遇到过两个不同的色谱柱,检验出来的含量差很多的情况?

液相色谱(LC)

  • 大家做含量时遇到过两个不同的色谱柱,检验出来的含量差很多的情况?我们做大豆磷脂的检验,用不同的色谱柱检验出来的结果差了4-5%,大家帮分析一下可能是什么原因引起的。(用的是同一个对照品和流动相。对照品也配了2遍了。)

    附:检验条件

    色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂250mm×4.6mm×5μm柱温为40℃;以甲醇冰醋酸三乙胺(85:15:0.45:0.05)为流动相A,以正己烷':异丙醇流动相A20:48:32)为流动相B;流速为每分钟1ml,按下表进行梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器。

    <标准曲线的制备 称取溶血磷脂酰胆碱对照品适量,精密称定,用三氯甲烷甲醇(2:1)溶解,稀释制成每含磷脂酰胆碱2060、100、200300μg、精密量取上述对照溶液各20μl、注入液相色谱仪中,以浓度的对数值为横坐标,峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。
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  • 老多_小多

    第1楼2012/01/04

    从哪里复制过来的吗,怎么这么多乱码

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  • tangtang

    第2楼2012/01/04

    整理一下:
    大家做含量时遇到过两个不同的色谱柱,检验出来的含量差很多的情况?

    我们做大豆磷脂的检验,用不同的色谱柱检验出来的结果差了4-5%,
    大家帮分析一下可能是什么原因引起的。(用的是同一个对照品和流动相。对照品也配了2遍了。)

    附:检验条件 色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂250mm×4.6mm×5μm,柱温为40℃;以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85:15:0.45:0.05,v/v)为流动相A,以正己烷-异丙醇-流动相A(20:48:32,v/v)为流动相B;流速为每分钟1ml,按下表进行梯度洗脱;检测器为蒸发光散射检测器。 标准曲线的制备 称取溶血磷脂酰胆碱对照品适量,精密称定,用三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解,稀释制成每1ml含磷脂酰胆碱20、60、100、200、300μg,精密量取上述对照溶液各20μl注入液相色谱仪中,以浓度的对数值为横坐标,峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。 供试品溶液的制备 取本品0.1g,精密称定,置25ml量瓶中,加三氯甲烷-甲醇(2:1)溶解并稀释至刻度。

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  • tangtang

    第3楼2012/01/04

    反复更换这两根色谱柱,检测结果都是这样吗?

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  • suiniubei

    第4楼2012/01/04

    可能你没有做方法验证吧?

     标曲、回收率都重新做了没有?

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  • xiaowang268

    第5楼2012/01/05

    由于不同色谱柱的装填条件有差异所以装出的柱子也是有所不同的,可能是柱子问题

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  • aobowang

    第6楼2012/01/05

    不好意思,不知道怎么弄的,都成乱码了。

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  • 1818

    第7楼2012/01/05

    只要方法可行,不应该出现这种情况。是不是处理样品有问题!!

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  • zhaohua8011

    第8楼2012/01/05

    看看你的测定结果是不是在线性范围内?

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  • wqm321

    第9楼2012/01/07

    对于这样的液相条件,流动相配比是很重要的,而且一般的硅胶柱子不建议有水,有些厂家的硅胶柱子做了特殊处理,可以使用一定的水,但这种长期的实验,你这些要检测的物质建议改换氨基柱,并准确配制流动相,每次配制的时候尽量多一些,以减小误差。

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  • nzclz

    第10楼2012/01/08

    柱规格一样吗?填料一样吗?峰形和塔板数有差别吗?

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