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液相有关物质,基线波动大,且重复性很差?

  • 曼珠沙华
    2012/01/10
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 液相梯度洗脱检查有关物质,基线波动大,且重复性很差,基线不平正常吗?重复性差如何解决?
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  • happy爱米粒

    第1楼2012/01/10

    当然不正常,基线问题检查下流动相和检测器

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  • tangtang

    第2楼2012/01/10

    梯度洗脱对溶剂要求较高。

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  • sally0326

    第3楼2012/01/11

    楼主最好把流动相、梯度、波长等条件给出,这样才方便分析。

    有可能流动相与选择的波长本身就有干扰。

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  • 曼珠沙华

    第4楼2012/01/11

    1.色谱条件:C8柱,规格为4.6mm×25cm,膜厚5μm;检测波长为220nm,流速1.5ml/min,柱温为35℃,进样量20μl。
    2.溶液配制
    2.1.缓冲液1:配制3.3ml/L的磷酸溶液,用50%NaOH溶液调pH至2.5。
    2.2.缓冲液2:取十二烷基硫酸钠适量,以缓冲液1为溶剂,使溶液中十二烷基硫酸钠的浓度为8.7g/L。
    2.3.缓冲液3:取乙二胺四乙酸二钠适量,以缓冲液2为溶剂,使溶液中乙二胺四乙酸二钠的浓度为18.6mg/L。
    2.4.溶液A:乙腈:缓冲液2(12: 13)
    2.5.溶液B:乙腈:缓冲液2(7: 3)
    2.6.稀释液:乙腈:缓冲液3(2: 3)
    流动相如下:
    0-10min,溶液A100%,10-25min,溶液B100%,25-35min,溶液A100%
    检测样品用稀释液配制

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  • opo1005

    第5楼2012/01/11

    等梯度洗脱的时候基线是会漂移的,但是是有规律的,如果重现性差,你要看看,你的泵是不是混合的有问题了。

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  • superstu

    第6楼2012/01/11

    是不是有气泡?溶剂过滤头是否堵塞?系统是否漏液?柱子是否平衡好了?柱子和流动相是否有污染?

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  • lcsolution

    第7楼2012/01/11

    0-10min,溶液A100%,10-25min,溶液B100%,25-35min,溶液A100%
    流动相直接转换没有过渡啊,我们有一个品种也出现过这样梯度但后来给我改了

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  • 曼珠沙华

    第8楼2012/01/12

    排除有气泡的问题,经过脱气和过滤,仪器本身又自带脱气机。柱子是新的,流动相也是新配置的,系统漏液会有提示的,所以找不出什么问题

    superstu(superstu) 发表:是不是有气泡?溶剂过滤头是否堵塞?系统是否漏液?柱子是否平衡好了?柱子和流动相是否有污染?

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  • 曼珠沙华

    第9楼2012/01/12

    怎么改的?

    lcsolution(lcsolution) 发表:0-10min,溶液A100%,10-25min,溶液B100%,25-35min,溶液A100%
    流动相直接转换没有过渡啊,我们有一个品种也出现过这样梯度但后来给我改了

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  • true blood

    第10楼2012/01/12

    有时候有机溶剂和缓冲液边混合边梯度洗脱的时候,由于两相比例的变化会导致泵内或流路内有结晶析出,导致基线不稳。你可以先用烧杯自己将其梯度混合,看看是否有结晶。

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