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怎样设置洗脱梯度,才能去除干扰峰??

  • conniegeng
    2012/03/02
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 我用的是岛津LC-10ATVP色谱仪

    流动相A是磷酸二氢钾,含0.8%THF,PH5.8. 流动相B是甲醇和已腈的混合(3:1)。

    现在做三种氨基酸混标的标准曲线,但是出峰时间一张不是很稳定,第一个峰后段和第三个峰前段有干扰峰,我调整了十几次洗脱梯度了,改变不明显。第一次出峰时间在9min左右,第二次在14min左右,第三次在18min以后出峰.

    最初洗脱梯度设置:

    0-6 miin B% : 25%

    6-8 miin B% : 25%--42%

    8-11 miin B% : 42%-42%

    11-14 miin B% : 42%-50%

    14-18 miin B% : 50%-75%

    18min STOP

    荧光检测波长 :激发波长:340nm,发射波长:455nm
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  • 老多_小多

    第1楼2012/03/05

    既然不行,就不要走阶梯的,试一试连续上坡的,比如0-15分钟从25%-40%

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  • 蓝人

    第2楼2012/03/06

    应助达人

    把谱图传上来大家看看

    帮你找找问题

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  • 老多_小多

    第3楼2012/03/07

    3个氨基酸应该很好分离的,也不知道是不是楼主的试剂纯度不够造成

    Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:把谱图传上来大家看看

    帮你找找问题

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  • 安平

    第4楼2012/03/29

    应助达人

    梯度空白是否正常 ?

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