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怎样设置洗脱梯度，才能去除干扰峰？？

  • conniegeng
    2012/03/02
    • 私聊

液相色谱（LC）

  • 我用的是岛津LC-10ATVP色谱仪

    流动相A是磷酸二氢钾，含0.8%THF，PH5.8. 流动相B是甲醇和已腈的混合（3:1）。

    现在做三种氨基酸混标的标准曲线，但是出峰时间一张不是很稳定，第一个峰后段和第三个峰前段有干扰峰，我调整了十几次洗脱梯度了，改变不明显。第一次出峰时间在9min左右，第二次在14min左右，第三次在18min以后出峰.

    最初洗脱梯度设置：

    0-6 miin B% : 25%

    6-8 miin B% : 25%--42%

    8-11 miin B% : 42%-42%

    11-14 miin B% : 42%-50%

    14-18 miin B% : 50%-75%

    18min STOP

    荧光检测波长 ：激发波长：340nm，发射波长：455nm
  • 分
  • 该帖子已被版主-蓝人加3积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖
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    +关注 私聊

  • 老多_小多

    第1楼2012/03/05

    既然不行，就不要走阶梯的，试一试连续上坡的，比如0-15分钟从25%-40%

0
    +关注 私聊

  • 蓝人

    第2楼2012/03/06

    应助达人

    把谱图传上来大家看看

    帮你找找问题

0
    +关注 私聊

  • 老多_小多

    第3楼2012/03/07

    3个氨基酸应该很好分离的，也不知道是不是楼主的试剂纯度不够造成

    Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:把谱图传上来大家看看

    帮你找找问题

0
    +关注 私聊

  • 安平

    第4楼2012/03/29

    应助达人

    梯度空白是否正常 ？

0
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