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求助帮忙解释一下这个奇怪的紫外实验现象,多谢!!!

紫外可见分光光度计(UV)

  • A和B之间有络合,A有吸收,B没有。

    配置A浓度固定,B浓度逐渐增加的系列溶液,然后上UV-VIS。

    从文献上看,混合后应该A的吸光度变小,表明在B的作用下A的形态发生了变化。

    但是我们的实验里,发现直接加入B以后测量,UV的吸光度变大。

    如果此时把溶液过滤一下再测,吸光度又较A小。


    而且继续增加B的浓度,过滤前吸光度继续变大,过滤后更加小。


    事实上到了一定浓度,过滤以后基本上没有吸收了。


    我现在怀疑是形成了络合物析出来了,但是因为是稀溶液,A的浓度是30 nM,对着光也不敢肯定那些悬浮的是灰尘还是络合物。


    所以如果有光谱高手麻烦解释下这个现象,多谢。


    btw,测CD的时候没有过滤,直接测,增加B的浓度,吸光系数一直是减小的。这又是为什么?
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  • tutm

    第1楼2012/03/10

    从实验图看,有几点是应该可以确定的:
    1. A+B的生成物应该能提高260nm处的吸光度;并且能降低240nm以下的吸光度,这可能是B加入时,溶液有所稀释?

    2. 过滤后260nm处吸光度下降了,楼主的想法应该是可以的,这是常见的;但是240nm以下却上升了,这有点不好解释了。

    btw,所说的是什么意思啊?CD是另外的物质?

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  • grexx213

    第2楼2012/03/10

    呃,溶液里A的浓度没变,加入B以后是要定容的。

    btw是by the way的缩写 :)

    CD是圆二色谱。

    tutm(tutm) 发表:从实验图看,有几点是应该可以确定的:
    1. A+B的生成物应该能提高260nm处的吸光度;并且能降低240nm以下的吸光度,这可能是B加入时,溶液有所稀释?

    2. 过滤后260nm处吸光度下降了,楼主的想法应该是可以的,这是常见的;但是240nm以下却上升了,这有点不好解释了。

    btw,所说的是什么意思啊?CD是另外的物质?

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  • tutm

    第3楼2012/03/10

    哦,是圆二色光谱啊,我还以为是ABCD四个物质。
    用CD测到的吸光系数还与样品的旋光性有关,这样倒是可能部分排除了你生成的络合物影响,因此与你前面过滤后的结果趋势一致了

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  • grexx213

    第4楼2012/03/11

    呃,请问一下,“部分排除了你生成的络合物影响 ”是什么意思,生成络合物就没CD信号了?

    tutm(tutm) 发表:哦,是圆二色光谱啊,我还以为是ABCD四个物质。
    用CD测到的吸光系数还与样品的旋光性有关,这样倒是可能部分排除了你生成的络合物影响,因此与你前面过滤后的结果趋势一致了

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  • tutm

    第5楼2012/03/11

    CD测试不熟悉。
    我的意思是,CD测到的是某一旋光角度的吸光系数吧,生成的络合物也许没有旋光性了,比如形成的是你能过滤掉的微小颗粒,或者是形成具有类似内消旋性的聚集体了,由此对你测试A物质的CD没有明显的影响了

    grexx213(grexx213) 发表:呃,请问一下,“部分排除了你生成的络合物影响 ”是什么意思,生成络合物就没CD信号了?

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