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液相色谱测试样品基线遇到问题。。。。

feixig11103

2012/03/16

液相色谱（LC）

UPLC基线的问题
我是一个UPLC的新手，用的仪器是waters H-class的UPLC。我的实验条件是A相是1：1：8=水：离子对：甲醇，离子对是乙酸铵1M，PH=5.6，B相是1:1=甲醇：丙酮。柱子是BEH c18,2.1x50mm,1.7um。样品是叶绿素及其衍生物。样品中可能混有类胡萝卜素或是脂类或是极微量盐（主要是NaCl）。由于怕乙酸铵浓度过高，不断调低浓度之后，还是出现这种情况。附件中两个图分别是空白即丙酮和标样跑出来的图。大家帮我分析下原因啊，急死我了！谢谢了！

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蓝人

第1楼2012/03/16

应助达人

请把谱图附上

0

yqxxw-pptt

第2楼2012/03/19

丙酮的紫外吸收很强，我曾经已经使用丙酮作溶剂，用UPLC分析，基线有很强的倒峰。所以建议你不要用丙酮。

0

有水有渝

第3楼2012/03/19

应助达人

楼主的检测波长是多少，丙酮在254nm下都还有很强的紫外吸收，确实不适合于用紫外检测器检测的流动相，尤其还使用梯度洗脱。

0

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