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请教大家有关多肽样品色谱柱吸附问题

050241310

2012/04/22

液相色谱（LC）

我们在用waters Symmetryshield RP18 做多肽样品时（这个柱子是个小孔径的，在筛选柱子时这根柱子分离效果较好，所以选用），一根新柱子做一段时间后，有关物质的自身对照溶液主峰面积就会很小，跟未稀释的样品溶液主峰面积不成比例，就是柱子会吸附多肽样品，这个问题曾咨询过waters工程师，他们说过一些冲洗柱子的方法，比如用TFA体系的流动相水相和有机相梯度冲洗，试过这些方法，效果不是很好，不知道大家有没碰到过类似的问题，有什么好的办法来解决柱吸附的问题，谢谢各位！

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tangtang

第1楼2012/04/22

每次测定之后用梯度洗脱把吸附的多肽冲洗出来吧。

多肽测定一般是不是要用300A的柱子？

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050241310

第2楼2012/04/22

一般是300A的，在方法梯度里是会设置冲洗的，但是没什么用，

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mengqiangvictor

第3楼2012/04/24

首先要确定你柱子有没有选对，孔径，粒径等、
其次要判断到底有多少吸附
waters工程师说的没有错，一定要选择合适的流动相体系，做完样品，一定要大体积有机相冲洗色谱柱

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