仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
电泳仪
>
帖子详情
民工级琼脂糖电泳制胶TIPs
省部重点实验室
2012/05/05
私聊
电泳仪
1.称量agarose和buffer
Buffer不要用成H2O,称量相对准确。
这步悄悄地说可以稍微粗糙点,影响不大。
2.融胶,加热到胶产生大量的气泡时,拿出摇匀,继续加热到完全溶解,拿出摇匀,再加热到沸腾。
非常热,小心烫手,另外注意不要加热过度使胶冲出瓶子。因此注意选择起码为胶体积2倍以上的瓶子。保证胶混匀和完全溶解,减少可能因此引起的胶中孔径不均匀影响分离效果。
这步非常重要,如果胶热不匀会跑出非常科幻的条带。
3.倒胶,可用水浴的办法使胶冷却到60度左右,即手可以握住瓶子的温度,沿着制胶板的一侧,缓缓地一次性倒入。梳子最好是预先放好并固定的,注意梳孔的体积能点的下所有的样。用枪头赶掉气泡。
制胶的桌面相对水平。倒胶时尽量减少气泡的产生。EB如果在制胶时加入,在60度左右时加入,使终浓度为0.5ug/ml。不宜过低,染色成像不明显;不宜过高,导致背景太深。摇匀要沿着瓶壁摇动,尽量减少气泡产生的可能性。高浓度胶例如2%以上的EB很难摇匀,而且凝的速度也相对快,强烈建议跑完胶之后再用EB染色。
其实也可以滴加EB进胶槽,用枪头搅匀,跑完了再染有时候效果不是很好。至于60度怎么掌握。。。勉强不烫手就是了
4.室温凝胶30分钟
过程中不要碰到梳子,尽量保持胶的位置不移动。时间不宜过久,导致胶干燥变形;不宜过短,影响胶内部孔径形成。
这个一定要晾够时间,建议盖个一次性手套,不然胶失水过多就没法用了。
5.拔梳子,放入电泳槽。
缓缓地将梳子垂直从梳孔拔出,尽可能使梳子是同时从各个胶孔拔出的。暂时不用的胶最好放入电泳槽电泳液中浸泡。电泳液要浸没胶1mm。
这个不比PAGE胶,一般拔不出问题来。
相关话题
1
稳定同位素标记技术
2
多肽定制
3
qpcr产物DNA电泳,内参有条带,目的基因没有条带什么原因?
4
求助水稻种子纯度电泳检测方法
5
琼脂糖凝胶电泳注意事项
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
为什么20版《中国药典》中SDS-PAGE凝胶配方中,7.5%的配方表算出来浓度是约8%?
求助
2021/11/03
基因芯片技术知识概要
分享
2012/03/08
【求助】关于辅酶Q10
2011/01/12
双向电泳操作步骤及相关溶液配置
分享
2012/06/10
【资料】凝胶成像 知识普及
2011/01/03
求助,SDS电泳条带中间低两边高,而且条带特别高
求助
2021/09/15
ELISA方法的基本原理和操作步骤
分享
2012/05/15
【原创】SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
2010/08/19
SDS-PAGE蛋白胶目标条带下总是有重影,不同梯度的蛋白量试了还是有,但相同的蛋白之前跑过是没有重影的,请各位大佬帮忙找找原因
求助
2024/01/17
仪器的选择
讨论
2023/09/28
CE-SDS国产化试剂
求助
2023/02/17
安捷伦7100知识问答
分享
2022/10/31
凝胶电泳相关仪器采购
求助
2022/06/21
SDS-PAGE电泳条带非常宽,求大佬们帮忙分析下原因
已应助
2021/12/18
为什么20版《中国药典》中SDS-PAGE凝胶配方中,7.5%的配方表算出来浓度是约8%?
求助
2021/11/03
求助,SDS电泳条带中间低两边高,而且条带特别高
求助
2021/09/15
能力验证频次
求助
2024/06/27
环保设备为催化燃烧装置,监测固定源废气非甲、二氧化硫、氮氧化物。 是否需要保证催化燃烧装置脱附状态下时才进行检测?才算有效?
已应助
2024/06/27
求助,非甲烷总烃测定中,除烃空气0.4mg/m3,怎么计算的呢?是按总烃计算公式吗?
求助
2024/06/29
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
实验室检测记录能否使用Excel保存
求助
2024/06/28
仪器点火失败
求助
2024/06/28
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
安捷伦GC8860,FID点不着火的原因和处理方法?
求助
2024/06/27
再谈如何增加PCR 的保真性
分享
2012/05/05
Real Time PCR 两种常用的相对定量方法
分享
2012/05/05
确定PCR循环数的一点方法
分享
2012/05/05
GPC能否测聚乙烯、聚丙烯的分子量及分子量分布
原创
2012/05/05
电泳图的阅读体会-(心得)初学者必读
分享
2012/05/05
关于液相UV1201紫外-可见检测器的问题
求助
2012/05/05
求AAA98数据处理软件(98版本)
求助
2012/05/05
风淋室门使用时注意几个要点
原创
2012/05/05
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...