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琼脂糖凝胶电泳——给新手

  • 省部重点实验室
    2012/05/05
    • 私聊

电泳仪

  • 做了一小段时间的琼脂糖凝胶电泳, 有一些体会给新手们参考, 不当之处也请专家们指正.
    1. 加热时, 一定要煮沸, 以保证琼脂糖的完全溶解.
    2. 待溶液冷却至不烫手, 感觉温暖舒适时加EB. 一定要在通风柜里.
    3. 倒胶时, 可用干净的纸巾拭去气泡.
    4. 胶凝固后先倒入些电泳缓冲液以方便取梳子.
    5. 保证缓冲液淹过胶的边沿, 边沿部分常高出1-2mm.
    6. 有时需要大的上样孔, 可用胶带把几个相邻的梳齿粘在一起, 这种情况下, 尽量让胶液冷一些再倒胶.
    7. 如果只是为了看一下结果(不需要照相), 同一块胶可重复用1-3次. 有一次我跑了4遍, 条带很弱, 用加了EB的缓冲液(约10ul EB in 50ml 缓冲液)泡半小时后就如正常了.
    8. 要保存胶到第二天用, 可以保鲜膜包裹后放入4 度冰箱.
    9. TAE 电泳缓冲液也可重复使用, 至少10次没有问题.
    10. 为了防止电泳时两极缓冲液槽内pH和离子强度的改变，可在每次电泳后合并两极槽内 的缓冲液，混匀后再用。
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    +关注 私聊

  • wensy123456

    第5楼2013/08/08

    谢谢
    111111111111

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  • 会师楼

    第6楼2013/12/31

    多谢了，这个好。

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  • chenj566

    第7楼2014/03/26

    学习了，谢谢了！！这个太好了，经验啊！！

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