仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
评论
收藏
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
生命科学仪器
>
电泳仪
>
帖子详情
胶回收资料整理
省部重点实验室
2012/05/05
私聊
电泳仪
胶回收
1.
提高胶回收量的办法:
1)
增加电泳时的上样量。
2)
电泳缓冲液用新鲜配制的。
3)
切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。
4)
把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。
5)
溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有利于DNA与膜的结合,不过一般不要多余750ul。
6)
胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性(电荷)和疏水性使DNA与柱子结合,因此,若电泳缓冲液的PH偏高,可在溶胶液中加入10ul(PH 5.0,3mol/L的 NaAC);为了使DNA分子更好的拦截在膜上,可以添加30%异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7)
加洗脱液之前,将柱子在室温放置几分钟(大约需10分钟),以使乙醇充分挥发。
8)
最后少加些洗脱液,尽量减少回收体积,一般用30-50μl洗脱液洗脱(不能太少,否则无法浸湿膜反而不利于洗脱);洗脱液滴在膜中央,以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9)
可以在加入洗脱液之后,可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱,或用封口膜密封4度过夜,第二天再离心回收,效果不错。
10)
将离心后的洗脱液加回吸附柱,再次离心。
相关话题
1
稳定同位素标记技术
2
多肽定制
3
qpcr产物DNA电泳,内参有条带,目的基因没有条带什么原因?
4
求助水稻种子纯度电泳检测方法
5
琼脂糖凝胶电泳注意事项
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
双向电泳操作步骤
分享
2012/06/10
【求助】UVP凝胶成像
2008/05/22
等电聚焦(最后))
分享
2012/07/03
[求助]关于毛细管凝胶电泳
2006/04/05
对电泳胶上的斑点做定量,用凝胶成像分析系统好,还是用薄层扫描仪好?
2006/09/09
【分享】GFP在大肠杆菌中的诱导表达和细菌蛋白的超声破碎抽提
2011/01/21
在凝胶电泳检测病毒和做胶回收提质粒时 胶的浓度分别为多少效果比较好?
悬赏帖
2019/04/17
重组子的筛选和鉴定
分享
2012/02/22
SDS-PAGE蛋白胶目标条带下总是有重影,不同梯度的蛋白量试了还是有,但相同的蛋白之前跑过是没有重影的,请各位大佬帮忙找找原因
求助
2024/01/17
仪器的选择
讨论
2023/09/28
CE-SDS国产化试剂
求助
2023/02/17
安捷伦7100知识问答
分享
2022/10/31
凝胶电泳相关仪器采购
求助
2022/06/21
SDS-PAGE电泳条带非常宽,求大佬们帮忙分析下原因
已应助
2021/12/18
为什么20版《中国药典》中SDS-PAGE凝胶配方中,7.5%的配方表算出来浓度是约8%?
求助
2021/11/03
求助,SDS电泳条带中间低两边高,而且条带特别高
求助
2021/09/15
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
如何做好体系工作?
分享
2024/07/01
多人主检的报告,检测审核应该怎么签字
求助
2024/07/05
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
聚合酶链反应 建议与问题
分享
2012/05/05
用变性梯度凝胶电泳、PCR及GC发夹检测突变
分享
2012/05/05
醋酸纤维素薄膜电泳
分享
2012/05/05
民工级琼脂糖电泳准备步骤
分享
2012/05/05
民工级琼脂糖电泳上样和照胶TIPs
分享
2012/05/05
民工级琼脂糖电泳制胶TIPs
分享
2012/05/05
再谈如何增加PCR 的保真性
分享
2012/05/05
Real Time PCR 两种常用的相对定量方法
分享
2012/05/05
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...