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基线不稳,锯齿样

  • lixuan20091225
    2012/05/06
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 各位,我的基线一直呈锯齿状,波动在0-0.015AU,样品峰在0.003AU,我做定量分析,根本就不行.

    我换了新的毛细管,缓冲液也重新配了,过滤了,还是如此。不进样分离也是如此。

    冲洗条件是:1M NAOH 10min-0.1 NAOH 20min-ddH2O 20min-硼酸盐(15mmol/L、PH=10)20min,分离电压 30KV。

    今天用厂家的测试的缓冲液,不进样分离,基线还是不稳,是不是机子的问题啊?不过机子是才新买的,不应该啊。

    各位,帮想想呗。实在没辙了。
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  • srtong

    第1楼2012/05/06

    电压太大啦'降低到20试试。另外'新管子冲10min是不够的'得冲至少1h(1M NaOH)'日常冲洗用0.1M NaOH即可。

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  • nini2006

    第2楼2012/05/06

    电压确实太大了。LZ可以看看电流多少,一般超过80 uA都是很大的了。

    srtong(srtong) 发表:电压太大啦'降低到20试试。另外'新管子冲10min是不够的'得冲至少1h(1M NaOH)'日常冲洗用0.1M NaOH即可。

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  • lixuan20091225

    第3楼2012/05/07

    我试过10KV 20KV 电压,可是这样的话,我的样品峰就没了。我今天再延长冲洗时间试试~

    srtong(srtong) 发表:电压太大啦'降低到20试试。另外'新管子冲10min是不够的'得冲至少1h(1M NaOH)'日常冲洗用0.1M NaOH即可。

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  • lixuan20091225

    第4楼2012/05/07

    嗯 ,我今天延长冲洗时间试试~谢啦

    srtong(srtong) 发表:电压太大啦'降低到20试试。另外'新管子冲10min是不够的'得冲至少1h(1M NaOH)'日常冲洗用0.1M NaOH即可。

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  • nini2006

    第5楼2012/05/07

    那么大的电压,电流会很大,会产生很多焦耳热,管子里的溶液对流就强烈,基线必定不稳。如果必须要那么大的电压,那么试试降低buffer的浓度以降低电流,看看结果会如何。否则就只能牺牲基线了

    lixuan20091225(lixuan20091225) 发表:我试过10KV 20KV 电压,可是这样的话,我的样品峰就没了。我今天再延长冲洗时间试试~

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  • ericwong

    第6楼2012/05/07

    降低分离电压不会导致样品峰的消失,只会让样品峰的出现拖后。

    lixuan20091225(lixuan20091225) 发表:我试过10KV 20KV 电压,可是这样的话,我的样品峰就没了。我今天再延长冲洗时间试试~

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  • lixuan20091225

    第7楼2012/05/07

    ]

    这是不进样,分离缓冲液的图260nm。冲洗时间1M NAOH延长到1小时了。电压还是30KV,电流在100。帮忙分析下呗。谢谢啦。
    明天我再试下10KV电压。

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  • lixuan20091225

    第8楼2012/05/07

    嘿嘿,谢谢你!
    30KV的时候大概在7分钟的样子出了样品峰,我改成20KV,结果30min还没出峰呢。是什么个情况呢?

    ericwong(ericwong) 发表:降低分离电压不会导致样品峰的消失,只会让样品峰的出现拖后。

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  • nini2006

    第9楼2012/05/07

    首先,基线爆高,不解。另外,这个这个基线不算不平。这个所谓“锯齿”是对比放大得出的效果。你再发个有峰的图来看看。

    lixuan20091225(lixuan20091225) 发表:]

    这是不进样,分离缓冲液的图260nm。冲洗时间1M NAOH延长到1小时了。电压还是30KV,电流在100。帮忙分析下呗。谢谢啦。
    明天我再试下10KV电压。

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  • lixuan20091225

    第10楼2012/05/07

    今天没考回来,明天发。

    我也不理解,最近做出来的就是这样,暴高,10KV也是如此,当然比这个要低一些。

    这个图是今天改到1小时后的,较前有好转,但是感觉还是不够。

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