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CE基础知识系列（3）：各种电泳模式的应用

nini2006

2012/04/18

毛细管电泳（CE）

本活动分为5个系列，系列之间的关系或为递进关系或为并列关系。每周一个系列，形式不定，如为竞猜形式则以多对多得不对不得为原则，竞猜期一个星期，一星期后将公布答案，竞猜结束。

CE基础知识系列（3）：各种电泳模式的应用

由于各种原因导致本系列到现在才能跟大家见面，sorry N次方。
本期的基础知识将从电泳模式的选择角度来谈CE的应用，不设再设奖品（加分）。

毛细管电泳模式的选择，可以有不同的原则，比如简单性、目的性、普适性、选择性、样品的特异性等。

以简单性为原则时，所选分离模式的操作、条件优化、分离控制等必须是最简单和最容易的，而且富于后续变化。根据这已道理，首先应该考虑自由溶液分离模式，最后才考虑填充形式的分离模式（图1）。简单原则是毛细管电泳模式的一般规则。

图1 CE分离模式选择流程

在分离生物样品时，通常需要根据分离的目的来选择分离模式：欲测定样品的尺寸，就须选择非胶筛分毛细管电泳（NGCE）或毛细管凝胶电泳（CGE），偶而可选用区带电泳（CZE）或胶束电动色谱（MEKC）；要测定样品的等电点的话则应选用毛细管等电聚焦电泳（CIEF）；在进行亲和作用研究时，则应首选亲和毛细管电泳（ACE）。

我们的分析目的可能并不是单一的，这时的分离模式选择，就应该注意考虑其通用性。CZE、MEKC和毛细管电色谱（CEC）的通用性和可调节性都较大，但根据简单性原则，还以CZE或MEKC为优。注意，填充型毛细管电泳不适用于颗粒样品的分离，甚至也不适用于大分子分离。

有时候，我们会特别注重分离的选择性，即只希望把目标组分分离出来。此时应优先考虑选择性高的分离模式，如ACE等。如果已知样品的某些特性，也可以根据此选择分离模式。比如在分离蛋白质和多肽等两性样品时，可以优先考虑CIEF；在分离中性分子时，优先考虑MEKC；在分离水难容组分时，优先考虑沸水毛细管电泳形式等。

总的来说，CZE最简单，最稳定，容易控制，适用性广。广泛用于药物、环境、农药、食品等领域中，实现醇、黄酮、喹啉、酚等有机化合物的分离。但是对于复杂组分，CZE常常会表现得无能为力。由此才衍生出了那么多种类的分离模式。但并不是说，某种类型的物质只能对应单一种分离模式。比如手性分离，CZE（使用添加剂如手性金属络合物、手性冠醚、环糊精及其衍生物等）、MEKC、CGE、CEC都可以实现。对蛋白质分析，一般选择NGCE，NGCE，ACE等。DNA碎片分离可以采用任何模式，而尺寸分离则使用CGE和NGCE。糖及其缀合物的分析首先需要解决电荷问题。一般采用络合法、强碱电离或衍生使其带电。电荷问题解决后基本CZE就可以将其分离。

本期内容大多总结自《毛细管电泳技术及应用》（陈义编著，化学工业出版社，2000年）

上期两期主题：

CE基础知识系列（1）：CE电泳模式

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120316/3926304/

CE基础知识系列（2）：各种电泳模式的分离原理

http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120327/3947187/

下期预告：
CE基础知识系列（4）：各种CE装置的介绍

分
该帖子已被版主-老多_小多加15积分，加2经验;加分理由:辛苦

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yuduoling

第1楼2012/04/18

这个系列帖子非常好，将CE基础知识重新梳理，起到基础知识系统化并达到普及的效果

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老多_小多

第2楼2012/04/18

买一台仪器，这些模式都具备吗？还是要选择呀？

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nini2006

第3楼2012/04/18

大多数没问题，不过也有例外的。比如有些仪器就叫毛细管电色谱仪，那就只能用电色谱模式了。有些还得结合检测器来看你的分离模式。比如电致化学发光检测器的局限性就很大，很多用于提高分离度的添加剂本身就有电致化学发光响应。
老多_小多(emoc98311) 发表:买一台仪器，这些模式都具备吗？还是要选择呀？

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ybw354

第4楼2012/04/18

CZE最简单，最稳定，容易控制

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nini2006

第5楼2012/04/18

呵呵，同意吗?
ybw354(ybw354) 发表:CZE最简单，最稳定，容易控制

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ericwong

第6楼2012/04/19

CZE是最简单，不过影响因素也是很多的。
只是一个毛细管内壁吸附就会搞得晕头晕脑的。

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果果

第7楼2012/04/19

回复楼上：CZE吸附问题多用涂覆的方式特别是分离碱性蛋白质的时候

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935435728abc

第8楼2012/04/19

我喜欢，找了好久关于电泳的理论

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nini2006

第9楼2012/04/19

yes, 100% support you!
果果(gxm-430072) 发表:回复楼上：CZE吸附问题多用涂覆的方式特别是分离碱性蛋白质的时候

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nini2006

第10楼2012/04/19

PS: failed to use the chinese input today. What a tragedy! How am I supposed to do my daily work in this forum by this way?!

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