蛋白污染的C18柱，怎样清洗好呢？

很多情况下，用有机溶剂、缓冲液和酸,有时还加上离子对试剂等组成的配方清洗效果不错，但是每个物质的作用是什么，加这些的原理是什么?

清洗用的流动相配比呢？按照样品中蛋白的含量自行调整吗？

还有一点，蛋白的样品，一般都是水溶性很好的，流动相中水相比例是很高的，我猜测为了印制蛋白的电离，经常流动相中还要加缓冲盐调PH，这样的话，对于不能耐受纯水的柱子，无疑是个重创啊。所以比较好奇，做蛋白样品的话，平时是如何保养柱子的？

生物样品污染的柱子的清洗方法
1%的乙酸水溶液
1%的三氟乙酸水溶液
0.1%四氢呋喃/正丙醇= 40/60（需降低流速）
三乙胺/正丙醇= 40/60（混合前用磷酸调pH至2.5）
或者：将色谱柱反转，与检测器断开，用5倍柱体积的100%异丙醇清洗，然后使用3~5倍柱体积的二氯甲烷，3~5倍柱体积的异丙醇，最后再返回原始的溶剂体系

木老师，方法是哪里来的？有没有问题？

看看色谱柱的说明书，有再生的程序的。

安谱老师好，这是参考别的厂商的培训资料，没试验过，如果不放心，酸的浓度可以放低一些，呵呵

感觉是再生的方法。

试了一下百分之十的三氟乙酸水溶液比90的乙腈，反向低速冲柱子过夜，不接检测器，结果柱子好了，不再分叉。