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关于样品液相检测中的干扰问题！

penglin1984

2012/07/06

液相色谱（LC）

这段时间我一直在做血浆样品的HPLC检测，对于期间遇到的一些问题想提出来跟大家讨论交流一下。
做犬血浆样品的时候，在目标峰位置处有干扰，导致双峰或者峰形拖尾严重。对于此类问题，一般建议的解决方法有以下几种：（1）微调流动相的比例，尽量将干扰峰跟目标峰分离，消除干扰。
（2）调节流速，分离干扰峰跟目标峰。
（3）调柱温。
（4）调节流动相pH值。
（5）样品过滤，或者经过固相萃取净化。
（6）调节检测波长。
（7）换流动相。
（8）换柱子。
不知道做过血浆样品的朋友有没有遇到同样干扰的问题呢？解决办法是怎样的呢？请给出交流意见，谢谢！

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zhaohua8011

第1楼2012/07/06

样品沉淀离心处理后，过滤膜，色谱柱最好连接保护住！

0

penglin1984

第2楼2012/07/06

我的血浆样品氮气吹干后流动相复溶，12000r/min离心10min后HPLC分析。因为200微升复溶，就不可能过滤膜了。这个干扰问题还是不太容易解决呢
zhaohua8011(zhaohua8011) 发表:样品沉淀离心处理后，过滤膜，色谱柱最好连接保护住！

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houjjun

第3楼2012/07/06

什么意思，没看明白
penglin1984(penglin1984) 发表:我的血浆样品氮气吹干后流动相复溶，12000r/min离心10min后HPLC分析。因为200微升复溶，就不可能过滤膜了。这个干扰问题还是不太容易解决呢

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有水有渝

第4楼2012/07/07

应助达人

意思就是样品量太少，不可能再过滤了，最好能上一个图，同时楼主都按自己所列出的方法试验过了，都不理想吗？
houjjun(houjjun) 发表:什么意思，没看明白

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houjjun

第5楼2012/07/07

是什么流动相？可不可以调一下流动相的比列

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oceanhu2009

第6楼2012/07/08

在样本处理时尽可能的浆内源性杂质除掉，常用的方法就是楼上那些朋友说的，不过因生物样品量少，处理繁琐使得回收率不高，因此要以最少的处理步骤来处理。沉淀然后高速离心是最常用的，对于这样处理后还有内源性干扰的话，可以针对干扰物来处理，例如往乙腈中加点酸或碱等，可起到良好效果。

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分
该帖子已被版主-有水有渝加2积分，加2经验;加分理由:感谢应助

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