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我初学液相求教

  • yiyangxuewu
    2006/05/06
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 今天刚学习液相,用的是赛尔泰500二元高压泵,柱子是迪马ODSC-18柱子,梯度洗脱做色素日落黄、柠檬黄,方法是GB/T5009合成色素,外标法标准曲线的过程中发现一开始做得好好的,一个六分钟左右出的峰,一个十分钟左右出的峰,可到后来在进几针练练吧这两个峰都没有出来,而十七分钟出来个一个大大的峰不知道是什么,而且基线在两分钟左右时往下掉掉到电压-50左右,这是怎么回事?并且先出来日落黄、柠檬黄峰的那几张图峰形分离很好就是保留时间每次不一致,这是怎么回事啊?我以为是柱子污染了又用同样的梯度洗脱走了两遍,发现仍然有那个大峰怎么回事?请多多赐教不胜感激!
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  • 杰斐逊

    第1楼2006/05/08

    流动相是什么,流量稳定吗

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  • shgtj

    第2楼2006/05/08

    我怀疑是你每一针的样品都没有走完带到下一针里了.

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  • shaweinan

    第3楼2006/05/08

      你进的是对照品还是样品?正常的有几针,它们的保留时间和峰面积的重现性怎样?

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  • 独角兽

    第4楼2006/05/08

    同样有此怀疑。楼主再检查一下操作过程吧。

    shgtj 发表:我怀疑是你每一针的样品都没有走完带到下一针里了.

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  • zhuwenjie

    第5楼2006/05/08

    个人认为是样品走的时间太短,而后平衡时间不够。

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  • shaweinan

    第6楼2006/05/08

      赞同这一说法,建议最好不要用色素进行练习,这一类样品比较伤柱子。

    zhuwenjie 发表:  个人认为是样品走的时间太短,而后平衡时间不够。

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  • wjl0220

    第7楼2006/05/08

    与缓冲盐很有关系,你看看是不是盐的含量过高

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  • houfeng-8422

    第8楼2006/05/08

    不知道您的具体方法怎样,很难判断;有可能是柱子的原因,也有可能是流动相的原因,还可能是进样器的原因;有可能是污染,有可能是与流动相或柱子填充物反应,要具体查清原因。

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  • ting1115a

    第9楼2006/05/09

    应该是平衡时间太短吧,在你的目标组分出峰后应该多等一会

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  • shaweinan

    第10楼2006/05/10

      楼主找到问题了吗?
      用梯度洗脱,在做完一个样品后,如果色谱柱的平衡时间不够,在做下一个样品时,就可能出现开始的色谱峰保留时间的不重现。如果流动相用的试剂质量不好,或者紫外检测器的检测波长比较低,就可能出现基线上漂或下漂的情况。

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