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Q1响应良好Q3没有碎片,苦恼

液质联用(LCMS)

  • 化合物是紫杉醇,仪器是3200QTRAP,针泵进样优化条件,Q1响应良好,加氢,加氨,加钠峰都有,但是MS2打不出碎片,仅仅有一两个低质量区碎片还不稳定。这样根本就没有办法优化条件,液质联用的检测限也不行。但是EPI有丰富的碎片信息。怀疑是化合物的问题,但是在API4000上能扫出丰富的MS2碎片,问工程师,答不出什么来。

    有没有遇到上述问题的朋友,帮一下忙。谢了。
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  • dark_wzy

    第1楼2012/08/14

    看了一下紫杉醇的结构,感觉应该有几个显著的碎片离子,会不会是质谱参数没有优化好?没有用过QTrap,所以不敢妄下结论。

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  • kkeats

    第2楼2012/08/14

    等工程师的WEBEX了,国内的解决不了,找北美区的WEBEX解决

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  • kkeats

    第3楼2012/08/14

    是CXP的问题,默认值是3,针泵优化的时候,将默认值升高为7或8左右,MS2的子离子就会好很多,>300的高质量段碎片连同母离子就出来了。这就是小分子化合物(MW200上下)正常,而大分子(600网上)没有高质量段碎片的原因。这种现象给人的错觉是碰撞能量设置到最小都会把母离子碰碎。李立军工程师给解决的。

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  • sinoga

    第4楼2012/08/17

    你那里还有利血平的标准品么?可以试试Q2的碰撞情况和离子传输效率,过程如下:

    1、先分别用PPG标准品调谐和校正下Q1和Q3,校正的半峰宽在0.6—0.8之间,质量偏移在0.1amu之内,m/z906的强度为:Q1 >1.1E7,Q3 > 8.1E6,

    2、第一步没问题之后,上利血平标准品,浓度水平为0.16pmol/L(标准品盒子里有,但是注意是否过期),用针泵进样,优化DP,GAS1等参数,用Q1扫描的方式,测试信号m/z609.2,记录十次累加的信号强度;

    3、用Product ion扫描模式,以609.2为母离子,DP和GAS1的参数同第2步,扫描175.2,Range为6amu,碰撞能为50eV,优化CXP,然后记录子离子十次累加的信号强度;

    4、用第三步得到的信号强度 除以 母离子的信号强度,这个数字应该大于6%,表示离子传输效率,如果传输效率太低,则表示Q2部分有问题;如果得到的数字合适,那么就要优化紫杉醇样品的质谱条件了,不要再怀疑仪器由问题了。

    5、如果离子传输效率小于6%,可能的原因有:1、Q2碰撞池污染,很多是由于N2不纯造成的;2、CAD气体没开,你可以通过查看真空度来确认,比如在Q1扫描情况下,真空度约为0.8到1.0,而Q2扫描下CAD的不同,真空度会改变,约为2.0以上;3、碰撞能有问题,其实这个是电压,可以测量下RO2的电压,用万用表插入到LENS板上的测试孔中,具体是哪一个你可以看帖在仪器面板上的那张纸,如果看到随着R02的改变这个数字也改变(比如R02为20V的话,测量到的电压为0.2V),那么表示RO2没问题,如果RO2不对,那么有可能是LENS板子有问题或者DAC电路板有问题。

    经过以上测试,应该对你的问题有帮助,最起码对你的判断方向有些帮助,祝你好运!! :)

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  • sinoga

    第5楼2012/08/17

    这个问题很简单,不用到国外找专家吧

    kkeats(kkeats) 发表:等工程师的WEBEX了,国内的解决不了,找北美区的WEBEX解决

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  • sinoga

    第6楼2012/08/17

    跟LZ分享下,我又一个朋友做紫杉醇分析,他们用APCI离子源,信号的绝对强度没有ESI好,但是信噪比好很多,基线和峰形很漂亮,因为APCI的响应选择性比较强,不像ESI那样对所有的样品都响应,所以基线比较好,噪音低,S/N比较好,如果您有兴趣可以试试。

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