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[转帖]GC和GC/MS分析常见错误观念(二)
瓢虫
2006/05/11
私聊
气相色谱(GC)
转自中国色谱网,作者:Cation
检量线的修正系数值大于0.995, 定量分析就一定准确?
先声明一下,这一篇是炒冷饭,在前一阵子响应问题时就已经贴出来了,不过今天回家时间太晚,但由于觉得对一些色谱新鲜人会有一点帮助,所以编辑一下后还是把他重新贴出来。事实上不止是对于GC或GC/MS,只要是用于其它的仪器定量,也是有帮助的!
检量线法应以五个不同的浓度为原则, 经回归分析后其修正系数至少应该是0.995以上,如此才是一条可以使用的检量线, 对于一个严谨的分析, 这样还是不够的, 就像某位网友所发问之文中所述:「凭你们的经验您觉得我的待测样品中香豆素的含量会有可能偏离到超过50ppm吗?」, 仅凭眼看当然没办法确认! 单纯的以波峰面积或高度(Y轴)对浓度(X轴)所制作的检量线校正法有一个很大的问题, 就是由R值可以很清楚的知道, 也就是当它低于0.995的时候是不具线性, 但是要注意的是, R值仅是确定线性的品管标准, 但可不是决定定量是否正确的要素, 那得以其它的方式来确认了!
某些检量线误差是以各点的浓度代回方程式中计算浓度差值, 例如如果你的检量线浓度有10、20、30、40及50mg/L等五个浓度, 当分别注射入GC或GC/MS后可得到一个y=mx+c的方程式和一个r值, 我们就假设r=0.999好了, 0.999表示线性良好,接下来的动作, 就是分别把10、20、30、40及50mg/L等五个浓度在GC分析时所得到的波峰高度或面积分别都代入上述方程式中, 这样得到计算后的浓度可以与理论浓度相比较, 低浓度的误差%会比较高, 一般都是以10或15%为限制. 这就是检量线的可能偏差范围. 由这边可算得出来在各高中低浓度范围所可能产生的误差状况! 严谨一点确认作法是另行配制一个检量线中间点浓度, 注射入GC中计算及其浓度, 误差可接受的浓度为15%.
但是上面的作法事实上还是有问题存在! 例如说你的标准品的浓度本身就已经有问题了, 使用上面的方法是怎么都无法得知类似的系统误差. 最严谨的方法就是使用第二种来源的标准品来确认, 也就是说如果你的检量线是用Supelco的, 那就另外使用Merck或其它的品牌, 配制成检量线的中间点浓度注入GC中分析, 一般可容忍的误差范围以15%为标准(GC/MS分析, 可容忍的误差范围以20%为标准). 有些标准品实在很难买到第二种来源, 折衷的方法就是买与检量线使用之标准品相同品牌, 但不同批号的来使用!
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