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选对色谱柱,快速开发方法
biolabware
2012/09/12
私聊
液相色谱(LC)
色谱
分析中色谱柱的选择是方法开发过程中重要的一步,对于分离效率具有重大影响。一旦选错了色谱柱,将会无谓地延长和消耗方法开发和优化的时间和精力。许多实验室常常限制色谱柱的选用,常会将其方法建立在一种主流的
色谱柱
化学(例如惯用的端基封口的
C
18
色谱柱)上。然而,随着色谱柱技术的发展,现在有了差异性不断增加的基质颗粒和配体化学可供方法开发时筛查选择性和改善分离之用。
本文通过众多不同的
色谱柱
在选择性上的变化的实例,概述选择最优色谱柱固定相的重要性。
跨越众多色谱柱化学的样品筛查使用配有色谱柱管理器的
ACQUITY UPLC H-Class
系统完成。化合物洗脱次序的变化通过
UV
和
MS
检测器检测。正确选择色谱柱对于快速建立有效的方法和最大限度地降低进一步方法开发和优化的需求是非常重要的。
仪器和耗材
Ziprasidone
(齐拉西酮)碱降解样品:将氢氧化钠加入到
Ziprasidone
标准溶液中,将反应液加热
2
小时,用酸中和,转移至样品瓶中供进样用。
总之,
Ziprasidone
(齐拉西酮)碱降解样品表明在各种色谱柱颗粒和配体上的非常不同的选择性。若初始选择
BEH C
18
或
HSS T3
则需要增加方法优化步骤以便完全分离各个组份。相反,通过快速的宽范围的色谱柱筛查,选择早已表明良好分离的色谱柱则不必去做进一步方法开发工作。此例中,
CSHC
18
由于其尖锐的峰形和杂质与主峰之间优良的分离度而被选中。
结论
通盘考虑适宜的颗粒基质和键合相化学选择
色谱柱
对于快速开发有效的分离方法是一个重要工具。假如在开发新方法时一开始就没选对
色谱柱
将会导致昂贵的和不必要的后续优化试验。随着色谱柱技术的进展,有日益增多的不同基质颗粒和配体的色谱柱可供选择,用以优化色谱性能。对于任何基质中的组份分离,通过宽范围的色谱柱化学筛查样品的做法值得推崇。
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私聊
秋醉虞阳
第1楼
2012/09/13
怎么快速选择,我还是不太明白。
0
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