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两实验室间液相保留时间相差5分钟什么原因

wmmsx

2012/10/30

液相色谱（LC）

同一HPLC方法()在两个城市的实验室间进行测定，主峰出峰时间在约20min，两实验室间测定的主峰保留时间差异5分钟多，两个实验室间所用的试剂和色谱柱是同一个(使用的水不同，但都是去离子水)，色谱仪为Agilent 1200，实验也是同一实验人进行实验，实验环境(两实验室间温度差异在1摄氏度左右，湿度差异在10%左右)会导致这么大差异吗？是什么原因导致这么大的差别？谢谢讨论！

另外，法规有没有规定液相方法在实验室间转移时，保留时间需要一致，或者差异需控制在多少的范围？

分
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三人行

第1楼2012/10/30

最可能是水的问题，虽然都是去离子水，但使用的水不同，可能是水的pH值不同而导致保留时间差异。

0

依旧

第2楼2012/10/31

是仪器的因素，仪器本身1ml/min 有很大区别俩仪器的流量肯定有差别

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老多_小多

第3楼2012/10/31

这个跟被测物质也有关系，有的物质对PH、极性有很大的变化

0

houjjun

第4楼2012/10/31

两仪器系统的压力差的多不？

0

houjjun

第5楼2012/10/31

主要原因可能两点，1是仪器的流速，2是水的质量

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wmmsx

第6楼2012/11/01

去离子水都是密理博纯水仪处理得到的18.2M欧*厘米的水，不会有差别
三人行(jncxyy2012) 发表:最可能是水的问题，虽然都是去离子水，但使用的水不同，可能是水的pH值不同而导致保留时间差异。

0

wmmsx

第7楼2012/11/01

仪器都是经过公司内部的计量部门校验过的
依旧(17284539) 发表:是仪器的因素，仪器本身1ml/min 有很大区别俩仪器的流量肯定有差别

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wmmsx

第8楼2012/11/01

被测物质是重组抗体蛋白，是离子交换色谱法检测的，会有这么大影响吗？
老多_小多(emoc98311) 发表:这个跟被测物质也有关系，有的物质对PH、极性有很大的变化

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wmmsx

第9楼2012/11/01

柱压100bar，相差2bar左右
houjjun(houjjun) 发表:两仪器系统的压力差的多不？

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三人行

第10楼2012/11/01

可能是流动相在抽滤过程中有轻微变化。

0

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