苹果与荧光的故事

砷、硒、汞灯各两个

相处时光

之前苹果从来没有接触过荧光这方面的仪器，只是在论坛或者Q群里看到大家讨论，非常羡慕，虽然说四月份要给配原子荧光，但是苹果却一点事先准备工作都没有做。

苹果实验室本次配置的荧光是普析公司的PF6非色散原子荧光光度计，配件包括：显示器、机箱等。是由厂家来人上门安装调试的。苹果负责的项目是水中的砷和硒，而下面则是苹果在检测砷的过程中遇到的问题。

遭遇坎坷，第一个下马威

调试的过程有些小插曲，首先，因为我们的盐酸纯度不够，读本底空白的时候，就一直出峰，而且极其不稳定（曾经用氩气吹了通宵，不过苹果现在也没明白这个吹是个啥意思），试剂商店的盐酸五花八门，都各买一瓶来试也不行，由于盐酸是严格控制的化学试剂，我和科长经过多方打听，知道当地防疫部门用的是天津科密欧的盐酸，只有郊区的一家试剂商店有卖，可是必须让我们出具相关证明来购买盐酸，好说歹说，总算卖给我们一大瓶（约3000mL），拿回单位连夜调试，等苹果第二天上班一看，好家伙，一大瓶只剩下瓶底了，（这量还真不是盖的，比苹果能喝多了），苹果临危受命，冒充其他单位实验室的人员，厚着脸皮去那家试剂商店又买了一瓶，不过总体效果还是一般，后来又打听到说北京化工厂的盐酸好，又买了一瓶，和天津生产的效果差不多，但购买较容易，所以最终选择北京化工厂的盐酸。

盐酸方面的问题排除了，以为就不会再有试剂方面的问题出现了（这个想法让苹果在后来的实验过程中，吃了很大的苦头。）在厂家人员的指导下，学习熟悉操作规程，仪器结构以及管路的走向及仪器的工作原理。

二遇坎坷，再遇麦城

由于操作不够熟练，五六月份的检测还是送省完成，七月开始自己操作，恰恰这个月苹果就吃了其它试剂纯度不够的亏。我们使用的硼氢化钾、氢氧化钾、硫脲都是国药的，抗坏血酸是和测总磷的同事共用，水是普通的去离子水。

硼氢化钾溶液：称5.00g氢氧化钾溶于1000mL水中，再称20.00g硼氢化钾溶液溶于此溶液中，这个都是现用现配的。

盐酸溶液：5%浓度。

硫脲-抗坏血酸混合溶液：25g硫脲溶于500mL水中，再称25g抗坏血酸溶于此溶液中。

第一次的结果

七月常规检测数据。

负高压是280.00V，原子化器温度是200℃，B道主灯及辅灯电流是30mA。



不知道是没有反应完全还是什么原因，这次的曲线空白是-0.61和样品空白是-1.26，都接近0左右，而且标样的标准值是0.137±0.0137mg/L，而我做出来的标样含量是0.135mg/L，这个结果让我很受鼓舞，第一次独立操作，就做到这个程度，自己太满意了。

可是荧光马上就给自己来了一个下马威。

7.25，当地的某实验室请我们帮忙测个砷的样品，前一周刚刚测过，所以苹果自信满满，接纯水，溶试剂，开机启动，曲线空白还算正常，-1.56，其他点子荧光值比前一周的要偏大一些，样品空白却出了岔头，49.44，导致标样差了好多，这样一来，外来的砷样品含量测定我就一点把握都没有。仪器设置没有任何改变。



再测了第二次，因为感觉荧光值照上一周有点偏大，所以这次把灯电流调为27（其实这就是苹果没有认真看普析手册的结果）曲线空白是-3.45，样品空白是29.28，稍小了一点，可是标样还是偏小，砷含量也比前一次有很大变化，依然不敢确信。



此时，苹果的自信已经完全被打败了。

又测第三次，真是诡异，曲线空白是1.16，样品空白居然是-33.14，这次荧光值都有点偏大，标样倒是回来了，可是砷样品的含量我还是没有太大的把握。最后按照第三次的数据报给委托的实验室。



可能大家觉得有点怪，为什么苹果每次做的曲线都是不一样的呢，其实，苹果每次做曲线都是从0-10.00，一次做十个点子，然后再经过拟合后，剩下六个点子，再成线继续做样品，这也是苹果不太自信的结果，因为做六个点子，总是曲线不理想，尤其是1.00那个点子，总是要偏小一些。

这次的帮忙，苹果感触很大，自己胆小子，仪器不敢做太大的调试，比如调砷灯的光斑总是不能居中十字花、比如灯电流的大小、比如载液的管路卡子那个45度等等，自己反复的回想了几天，决定不能光靠厂家给讲解的那点东西，要自己来亲自动手调试积累经验。于是，8月21号开始，苹果就开始了曲折的调试之路。

相处磨合期

8.21，灯电流为40



曲线空白为-2.76，样品空白为90.08

8.21第二次，灯电流为33



曲线空白是-0.56，样品空白是7.19，两个空白还算是接近。做了七个标样，有两个偏低，不在标准值范围内的，剩下的五个有两个在下限附近，另外三个还算勉强真值附近，这个时候，苹果心中总是有一个误解，就是荧光测样品，平行性应该和分光光度计差不多，荧光值不会差这么多，所以这七个数值一出来，苹果还是非常不满意，因为平行性太差了。后来，经过跟厂家沟通，被告知，荧光测样品，就算是同杯位反复测量，也不可能只差几个荧光值的，最少都要差个20或30个呢，苹果这才稍稍有些释怀。

8.23第一次，灯电流为35



有了前一次的成功，苹果又恢复了一些自信，可是仪器又给苹果浇了半盆凉水。曲线空白是-4.69，样品空白是-4.37，可倒好，两个空白倒是平行，可是标样全部都偏大了。

8.23第二次，灯电流还是35



我重新稀释了一个20倍的标样，曲线空白是1.67，样品空白是38.91，标样只有一个在范围内，而且还是偏低。

8.24灯电流35



曲线空白是51.33，样品空白是46.06做了六个标样，两个稀释比的，都在范围内。因为用掉了一瓶氩气，所以苹果的调试工作暂时告一段落。不过在这段休整期间，苹果不断的回想自己的操作过程，发现如果采用自动稀释的话，1.00那个点子的荧光值总是偏小，总是要舍弃这一点曲线才是很好的，如果是手动稀释的话，就不存在这个问题。正巧这期间，普析厂家的技术人员来单位回访，针对这个问题，进行了一番讨论，厂家说，他们也建议尽量用手动稀释，这样可以避免由于因为进样量少而影响荧光值。

九月，虽然改回了正确的溶液浓度，但是标样的结果却又不是很理想，总是偏低，高浓度还可以，低浓度却总是相差很大，也就是说，如果考核的盲样中，砷含量很小的话，我的检测结果精度是很差的。恰恰这时，能力验证的考核来到了，又一次把苹果折磨的够呛。详见：苹果的第一次验证。

千呼万唤，苹果的师傅终于来苹果这里内审来了，其实主要就是来看我的荧光操作来了，配置试剂一系列准备之后，师傅肯定了我前段操作上的努力，只是发现我受试剂不纯的原因影响很大。因为之前，苹果做砷的曲线一直还算不错，只是空白有些偏大，所以导致对于低浓度的样品含量不敢十分确定。于是，师傅大胆的做了一个尝试，就是把原来5%的硫酸盐载流变成了，用5%稀释硫脲混合溶液来作为载流，严格按照普析手册上写的，灯电流就是35，调试仪器，以获得最大的荧光值。当天的效果真的不错，因为载液变成了混合溶液，所以曲线空白和样品空白都在0左右，曲线的最大点，虽然照手册上的数据小了一点，不过也超过了2000荧光值，反复测试了几次后，效果还是很好，只是师傅再三叮嘱，测试完毕后，一定要多清洗几次，因为是两个人交叉使用，所以避免污染管路，给别人造成不必要的麻烦。

加深感情

十月和十一月份的化验，都是按照师傅的方法去分析的，只是发现，十月份的分析中，曲线空白和样品空白居然能差到15个荧光值左右，反思后又跟师傅电话沟通，觉得还是混合溶液的反应时间不够，十一月份就好了很多。

终成正果

至此，苹果的荧光调试算是告一段落了，总结：一、事先的准备工作没有做到位，有了问题不去思考，只会张嘴去问。二、自己不敢动手摆弄仪器，师傅告诉我，仪器就是一个玩具，不能怕摆弄，一定要勤摆弄，才会知道怎么能让仪器听自己的话。三、试剂虽然也占据了一部分的原因，但是自己不能去思考一些新的突破，只是墨守成规的按规程操作，没有创新。

明年，苹果的实验室又要进大型仪器了，这次苹果一定要做好准备工作，不要让这样的调试之路，再这样艰辛了。

进新仪器的实验室的童鞋们，像苹果一样和大家这样分享，有照片有数据。

写的真好 对于我们新人来说，最重要的就是探索精神

应助达人

苹果的经验值得我去学习，我们的荧光大概明年3月回，主要是砷、汞的测定，不知道你们测汞测的怎样？

应助达人

我们也要买荧光，到时操作时是否向苹果一样曲折呢？

当时调试的时候，我死的心都有了，太上火了，还找不到什么原因

汞我不常测，遇到什么情况，咱们一起讨论吧。