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液相色谱梯度洗脱,基线出不正常峰

液相色谱(LC)

  • 用新买的C4柱,不接预柱,不进样品,空扳阀,在走梯度的时候,10%乙腈(0.1%三氟乙酸)水走30分钟变到100%乙腈的时候不出峰,但是100%乙腈走10分钟变到10%乙腈水的时候居然出峰了。
    之前柱子只进过萘的甲醇液,三针多肽的样品,溶剂是二甲基亚砜。不知道是怎么回事? 该如何分析这个问题呢?
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  • 三人行

    第1楼2013/01/25

    100%乙腈走10分钟变到10%乙腈水的时候出峰是梯度变化过快造成的。

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  • yzulcl

    第2楼2013/01/27

    应助达人

    顶沙发。
    个人觉得更直接的原因是压力的剧烈变化造成的。你可以试试,不接色谱柱(用两通代替),流动相也不改,开泵1分钟,停泵1分钟,……试试看,检测器基线也会有类似色谱峰形的波动。

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  • houjjun

    第3楼2013/01/27

    上个图看看吧,直观些

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  • 刘阿驽

    第4楼2013/01/28



    不好意思,图有些歪了。纵坐标响应值均为120mAU,梯度都是一样的,前一张图是只接两通,后一张图是接的C4柱,均未接预柱。梯度是,10%乙腈水10分钟,10%乙腈水30分钟变到100%乙腈,100%乙腈走30分钟,100%乙腈10分钟变到10%乙腈水(出峰了)。这样的梯度走了很多次,每次的响应值都是100mAU左右,不管加不加三氟乙酸。请各位高手帮小妹具体分析一下。谢谢了

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  • 武灵

    第5楼2013/01/28

    这个时间跨度有点大哈。楼主的这个图有点考眼力哦。具体出峰的时间点在哪里?峰宽多少?

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  • suiniubei

    第6楼2013/01/28

      你改变得太快了,当然会出峰。这个峰是假的,是因为你流动相变化所致。

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  • 刘阿驽

    第7楼2013/01/29

    一共走了185分钟,因为想看看最高的那个峰(110mAU),是不是因为进样阀污染的原因,所以同样的梯度走了两个时间段,只扳一下阀(未进样)。从100%乙腈10分钟变到10%乙腈水(出峰了)太快了吗?流速0.8mL/min,4.6*150MM的柱子
    。不然应该增长到多少时间呢?

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