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薄层色谱(TLC)
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求助:杂质分离不好的原因?急啊!!!
啄木鸟
2006/06/26
私聊
薄层色谱(TLC)
各位:以下是安宫黄体酮的杂质F 的TLC检测.可是按以下方法我做的薄层效果不好.不能分离,是何原因啊?
用薄层色谱法检测 ,使用TLC硅胶色谱板。
分别取加10μl的溶液点板,用10体积四氢呋喃试剂、45体积的1,1-二甲基乙基 甲基醚试剂和45体积的环己烷试剂配制的展开剂展开超过10cm,让色谱板在空气中晾干,然后用相同的展开剂在同一方向上再次展开超过10cm,加热色谱板到120℃并保持10min,用200g/l的甲苯亚璜酸乙醇溶液来喷板,加热到120℃并保持10min, 冷却。 在365nm的紫外光下检测,供试液(a)得到的色谱图中任一蓝色荧光斑点的Rf值比安宫黄体酮主斑点的Rf值要高,但是斑点的颜色不能深于参照液(a)得到色谱图中杂质F的蓝色荧光斑点(0.5%)。 只有当参照液(a)得到色谱图中有两个明显分离的斑点时,该测试结果才有效。
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