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病毒计数仪在定量病毒总浓度中的意义

省部重点实验室

2013/08/12

生命科学仪器综合讨论

我们知道噬斑法和TCID50法检测的是感染性病毒的浓度，并不体现病毒的总浓度（总颗粒数）。现在有越来越多的研究显示，很多病毒在包装过程中由于缺失基因组，形成空心病毒。或者在合成过程中，基因的突变或者缺陷导致蛋白的突变，造成病毒没有感染性。而这些非感染性病毒的数量在总病毒数量中所占的比例意义重大，能影响体内和体外的研究结果。所以快速的病毒总浓度定量方法是非常必要的。

流感疫苗的生产中，从鸡胚培养来源的流感疫苗在使用专门的试剂裂解后，收获免疫原蛋白HA。非传染性的流感病毒（被证实含有衣壳蛋白和部分的基因组）在裂解后同样能贡献免疫原蛋白HA。所以总病毒浓度的评估对流感疫苗的生产意义重大。

此外，总病毒浓度的定量也有助于减毒疫苗的生产。减毒疫苗是复制缺陷的非感染性的但是能引发机体免疫反应的一种疫苗。减毒疫苗既然不能复制，所以就不会引起细胞病变反应，而CCID50法则以细胞病变反应为判断基准。在某种意义上来说，所有的减毒疫苗是由非感染的病毒颗粒构成，因此，采用总病毒浓度定量的方法是减毒疫苗唯一可靠的方法。

在动物疾病的预防和治疗中，采用感染性方法测得病毒滴度来决定注射的剂量，往往忽视了非感染性病毒颗粒在动物免疫反应中的作用以及最终的药剂效果。比如噬斑法测得病毒滴度为1E6 pfu,但是总病毒浓度是1E8 vp/ml，在每一个感染颗粒中，有100个颗粒没有被计数，最终可能影响动物治疗结果。

考虑到非感染性病毒颗粒的生物学作用以及在疫苗生产的作用，感染性病毒颗粒和总病毒颗粒的定量对于病毒疫苗的生产和研究都至关重要，而病毒计数仪在10min内能快速获得病毒总浓度，所以能广泛应用于在病毒的研究和生产中。

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