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GPC 只配示差和激光光散射检测器 能做绝对分子量检测吗?

凝胶色谱(GPC)

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  • 有经验的各位达人,最近需要配GPC,想只配示差和激光光散射检测器 能做绝对分子量检测吗? 如果加上粘度检测器,大约成本增加多少?

    另外,如果是waters 或 Aglient 的仪器,配其他品牌的激光光散射,兼容性怎么样?

    谢谢!

histone1 2013/08/15

Absolutely!光散射+示差可以得到绝对分子量。 光散射或粘度,和进样器品牌不同,兼容性没问题,就是操作,维护会很麻烦。

tigertooth 2013/08/16

绝对分子量只要激光加个浓度检测器就可以,一般最常用的是RI,UV也可以,不过除了和RI一样要知道dn/dc值,还要知道样品的紫外消光系数。 加了粘度可以得到K和a值,以及流体力学半径Rh. 操作和维护也不麻烦,因为检测器没有什么可维护的。更多地是泵和柱子。 一般大学和研究单位的实验室样品比较杂,一会水相一会有机相,所以泵的损耗大,而样品种类很繁杂,有的带有的集团会损坏柱子。但这些实际不是检测器的问题。工厂好一些,样品固定方法固定,做完了多冲冲就OK了。 唯一常见的就是激光对试剂的要求比普通GPC高,而且做惯了GPC,刚开始会有些不适应LS。

小不董 2013/08/19

[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1002.gif[/img][quote]原文由 [b]tigertooth(tigertooth)[/b] 发表: [quote]原文由 [b]小不董(doxw0323)[/b] 发表: 你分析的目标物分子量大概多少?分子量比较小就需要粘度检测器比较好。 若分子量比较大就用LS,LS只能测定分子量大于1000以上的物质。 要想测定准确的绝对分子量还是比较难的,最好知道物质的dn/dc值,dn/dc值比较大的测定起来容易些。 用那家的仪器就最好用那家的检测器,这样兼容性要好很多,是这样考虑的,用多检测器就需要多检测器软件,否则不能计算。[/quote] 请解释一下,为什么分子量比较小用粘度检测器比较好?[color=#ff0000]我们可以这样理解, 分子量小的颗粒小, LS检测不到,没有信号,但是粘度是有的,而且分子量不同,差别不少没,比较灵敏。[/color] 分子量小,那粘度的信号就比LS好么,或者说相对好么?没有LS的信号,有粘度和RI的那充其量不还是相对的结果么? [color=#ff0000]分子量大的,粘度很大,也是因为粘度检测器原理决定的,粘度太大,需要的时间会增长很多,平衡时间更长。而LS可以检测到大颗粒的高分子物质。[/color] [/quote]

generalsky 2013/12/10

另外,买哪家的光散射,与仪器组装都不是问题。 很简单,看看安捷伦的蒸发光一直都是用Alltech的; 之前戴安[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]选用的视差检测器,都是shodex的。 每个公司都有侧重点,选这个公司最擅长的产品才是优选。 很简单,一个产品研发出来之后,需要很多年不断的优化。

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  • histone1

    第1楼2013/08/15

    Absolutely!光散射+示差可以得到绝对分子量。

    光散射或粘度,和进样器品牌不同,兼容性没问题,就是操作,维护会很麻烦。

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  • tigertooth

    第2楼2013/08/16

    绝对分子量只要激光加个浓度检测器就可以,一般最常用的是RI,UV也可以,不过除了和RI一样要知道dn/dc值,还要知道样品的紫外消光系数。
    加了粘度可以得到K和a值,以及流体力学半径Rh.
    操作和维护也不麻烦,因为检测器没有什么可维护的。更多地是泵和柱子。
    一般大学和研究单位的实验室样品比较杂,一会水相一会有机相,所以泵的损耗大,而样品种类很繁杂,有的带有的集团会损坏柱子。但这些实际不是检测器的问题。工厂好一些,样品固定方法固定,做完了多冲冲就OK了。
    唯一常见的就是激光对试剂的要求比普通GPC高,而且做惯了GPC,刚开始会有些不适应LS。

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  • 小不董

    第3楼2013/08/18

    应助达人

    你分析的目标物分子量大概多少?分子量比较小就需要粘度检测器比较好。
    若分子量比较大就用LS,LS只能测定分子量大于1000以上的物质。
    要想测定准确的绝对分子量还是比较难的,最好知道物质的dn/dc值,dn/dc值比较大的测定起来容易些。
    用那家的仪器就最好用那家的检测器,这样兼容性要好很多,是这样考虑的,用多检测器就需要多检测器软件,否则不能计算。

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  • tigertooth

    第4楼2013/08/19

    请解释一下,为什么分子量比较小用粘度检测器比较好?老是听人这么说,但不明白为什么?

    分子量小,那粘度的信号就比LS好么,或者说相对好么?没有LS的信号,有粘度和RI的那充其量不还是相对的结果么?

    小不董(doxw0323) 发表:你分析的目标物分子量大概多少?分子量比较小就需要粘度检测器比较好。
    若分子量比较大就用LS,LS只能测定分子量大于1000以上的物质。
    要想测定准确的绝对分子量还是比较难的,最好知道物质的dn/dc值,dn/dc值比较大的测定起来容易些。

    用那家的仪器就最好用那家的检测器,这样兼容性要好很多,是这样考虑的,用多检测器就需要多检测器软件,否则不能计算。

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  • 小不董

    第5楼2013/08/19

    应助达人

    tigertooth(tigertooth) 发表:请解释一下,为什么分子量比较小用粘度检测器比较好?我们可以这样理解, 分子量小的颗粒小, LS检测不到,没有信号,但是粘度是有的,而且分子量不同,差别不少没,比较灵敏。

    分子量小,那粘度的信号就比LS好么,或者说相对好么?没有LS的信号,有粘度和RI的那充其量不还是相对的结果么?

    分子量大的,粘度很大,也是因为粘度检测器原理决定的,粘度太大,需要的时间会增长很多,平衡时间更长。而LS可以检测到大颗粒的高分子物质。

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  • histone1

    第6楼2013/08/20

    没有LS的信号,有粘度和RI的那充其量不还是相对的结果么?

    RI+DP叫做普适校正,又叫做通用校正,得到的也是准确的结果,不是相对分子量。谢谢。

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  • tigertooth

    第7楼2013/08/20

    用普适校正还要做标样的校准曲线么?

    histone1(histone1) 发表:没有LS的信号,有粘度和RI的那充其量不还是相对的结果么?

    RI+DP叫做普适校正,又叫做通用校正,得到的也是准确的结果,不是相对分子量。谢谢。

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  • histone1

    第8楼2013/08/20

    需要。

    tigertooth(tigertooth) 发表:用普适校正还要做标样的校准曲线么?

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  • histone1

    第9楼2013/08/20

    需要。

    tigertooth(tigertooth) 发表:用普适校正还要做标样的校准曲线么?

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  • tigertooth

    第10楼2013/08/20

    既然需要标准曲线,那得到的结果不还是相对标样的么?当然经过普适校正可能比通用的准一些。

    但我的第一个问题还是没讲明白,小分子的样品,粘度检测器就一定能得到好的信号么?分子量小,粘度的信号不也会弱,信噪比不好么?所以样品分子量小,为什么用粘度和RI,就比LS和RI好呢?

    histone1(histone1) 发表:需要。

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