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液相色谱常用的纳米数是多少!

  • shuiyunjian2046
    2013/08/23
  • 私聊

化学药检测

  • 254、230、340nm分别适用什么类型的物质
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  • tianru的爸爸

    第1楼2013/08/23

    我们是做蛋白的,常有280nm和210nm。

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  • xiaowang268

    第2楼2013/08/24

    带苯环的254可以的

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:我们是做蛋白的,常有280nm和210nm。

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  • xiaowang268

    第3楼2013/08/24

    当然也要具体看化合物的结构了

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  • tianru的爸爸

    第4楼2013/08/26

    做蛋白的,一般都是从生物组织或者培养液中提取蛋白,这些原材料中都有一个物质:核酸,这些物质的主要吸收峰:260nm,所以做蛋白一般也看260或者254nm,但一般要求这个数要越低越好。

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:带苯环的254可以的

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  • xiaowang268

    第5楼2013/08/29

    为什么越低越好呢?

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:做蛋白的,一般都是从生物组织或者培养液中提取蛋白,这些原材料中都有一个物质:核酸,这些物质的主要吸收峰:260nm,所以做蛋白一般也看260或者254nm,但一般要求这个数要越低越好。

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  • xiaowang268

    第6楼2013/08/29

    只要带苯环都可以的吧

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  • tianru的爸爸

    第7楼2013/08/30

    在蛋白纯化中,蛋白或者目的蛋白是目标物,其余高分子物质的基本上都是异物,需要越低越好。

    而指证核酸含量的260nm或者254nm,所以要求相对低,才说明该物质被剔除干净。

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:为什么越低越好呢?

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  • xiaowang268

    第8楼2013/08/30

    还是没看明白啊

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:在蛋白纯化中,蛋白或者目的蛋白是目标物,其余高分子物质的基本上都是异物,需要越低越好。

    而指证核酸含量的260nm或者254nm,所以要求相对低,才说明该物质被剔除干净。

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  • tianru的爸爸

    第9楼2013/08/31

    在蛋白纯化过程中,有两个重要的污染物:核酸、多糖,这些物资与蛋白质同属于高分子化合物,分子量都很大,但在一般情况下与蛋白质较难分离的是核酸类杂质。

    核酸与蛋白质的紫外吸收上的差距,最大的差距就是在:
    蛋白的280nm吸收大于260nm的吸收;
    核酸的260nm吸收大于280nm的吸收。

    所以判断溶液中或者层析峰/色谱峰中还有多少核酸污染物,比较简单的方法就是用280nm比260nm,越大越好。

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  • xiaowang268

    第10楼2013/08/31

    哦,这个方法好啊,简单啊

    tianru的爸爸(lxdongzi2003) 发表:在蛋白纯化过程中,有两个重要的污染物:核酸、多糖,这些物资与蛋白质同属于高分子化合物,分子量都很大,但在一般情况下与蛋白质较难分离的是核酸类杂质。

    核酸与蛋白质的紫外吸收上的差距,最大的差距就是在:
    蛋白的280nm吸收大于260nm的吸收;
    核酸的260nm吸收大于280nm的吸收。

    所以判断溶液中或者层析峰/色谱峰中还有多少核酸污染物,比较简单的方法就是用280nm比260nm,越大越好。

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