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求解=毛细管电泳台阶跃式图谱是何原因?

毛细管电泳(CE)

  • 求解:毛细管电泳台阶跃式图谱是何原因?



    之前的一段实验新机器,新实验,势如破竹,一直接近结题,后来文章因为要补些数据,是由同组后来的人员做的实验,一段时期,检测出现特异性台阶式峰,有时候反复冲洗毛细管或者更换都未见情况有所改善,后面因为一些特殊的原因而没有机会去验证其原因何在,如今,将这些图谱传上来,供大家讨论,恳请高手能指点迷津……



    毛细管电泳仪胶束电泳检测苯乙醇胺类物质,以硼砂(Na2B4O7NaOH)为背景电解质,同时加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)组成运行电泳介质,采用毛细管胶束电泳分离结合二极管阵列(PDA)检测器检测,检测仪器为Beckman P/ACE MDQ毛细管电泳仪(美国贝克曼公司);二极管阵列(DAD)检测器200 nm检测。

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  • nini2006

    第1楼2013/10/08

    flysky一直都很严谨,写帖子从不含糊,真是榜样

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  • flysky97

    第2楼2013/10/08

    真正的原因是:

    家里上不了网,所以先把文章弄成图片了再传上来,

    效果可能不太理想,希望大家谅解……

    嘿嘿,不过俺把版主的夸奖领走了……

    nini2006(nini2006) 发表:flysky一直都很严谨,写帖子从不含糊,真是榜样

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  • nini2006

    第3楼2013/10/08

    这个现象比较奇怪,我怀疑电极有问题

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  • wy20071722

    第4楼2013/10/08

    图片不是很清楚,电流图和电泳图最好分别标出来。貌似电流是正常的,但是电泳图有台阶,不知道我有没有看错。可能有以下几个原因:
    1.进样量太大,这个似乎不是。
    2.Buffer有污染,特别是进样端的buffer。
    3.瓶帽有污染。
    4.冷却液有污染。

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  • beyond1977

    第5楼2013/10/09

    应助达人

    个人认为,柱子和缓冲液的可能较大,尤其是柱子。我们以前也有碰到这种情况

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  • cpudaxiao

    第6楼2013/10/11

    SDS浓度太大,或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

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  • flysky97

    第7楼2013/10/11

    我觉得缓冲液的可能性更大些,柱子是新换的……

    楼上说是SDS和NaOH浓度的原因,我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别,因为她做的时候,是用的我原来的标准液

    beyond1977(xsh6743) 发表:个人认为,柱子和缓冲液的可能较大,尤其是柱子。我们以前也有碰到这种情况

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  • flysky97

    第8楼2013/10/11

    缓冲液的怀疑是最大的,我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别,两者不均一,因为她做的时候,是用的我原来的标准液

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:SDS浓度太大,或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

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  • cpudaxiao

    第9楼2013/10/11

    最好现用现配。尤其是含SDS和氢氧化钠的buffer。

    flysky97(flysky97) 发表:缓冲液的怀疑是最大的,我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别,两者不均一,因为她做的时候,是用的我原来的标准液

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  • flysky97

    第10楼2013/10/11

    嗯,应该是这样的……

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:最好现用现配。尤其是含SDS和氢氧化钠的buffer。

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