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TL-2010S自动研磨仪DNA提取适用性评估
北京鼎昊源
2013/10/16
私聊
生命科学仪器综合讨论
TL-2010S
自动研磨仪
DNA
提取适用性评估
TL-2010S
自动研磨仪推出至今,越来越多用户体验了其在组织DNA提取中相对于手工研磨的方便性及高效性,近日我们在
北京某诊断试剂生产企业研发实验室做了一组样品对比实验。
实验目的
对比TL2010S中通量自动研磨仪与手工液氮法研磨后的新鲜组织样本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差异,评估自动研磨仪的适用性。
实验材料及试剂
1.
实验材料: 将 10 例 FT 样本分别用吸水纸吸干表面的水分后,称重后分装为2 管/例,20 mg±0.3 mg/管。
2.
实验试剂: 天根DP422 DNA/ RNA共提试剂盒
实验过程
1.
研磨
【自动研磨】向离心管内加入 300 μl 裂解液。将离心管放于液氮中,冷冻处理。
液氮冷冻处理后的离心管固定于自动研磨仪适配器中,向离心管中加入 2 粒 3
mm
磁珠。小心将适配器正确安装至自动研磨仪上,设置研磨参数: 5 轮循环数,60 s/轮,10 s 间隔。启动仪器,研磨组织。研磨后,再向离心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液总使用量为 600 μl) 。
【手工研磨】 取样本放于研钵中,加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中,称重后向其中加入 600 μl 裂解液。
2.
核酸提取、检测及保存
将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本,使用 DNA RNA 共提试剂盒同
时提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度计测定 DNA、 RNA 的浓度及纯度。 DNA提取后于-20℃保存,RNA 于-80℃保存。
实验结果
实验结论
自动研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取 FT 的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显著性差异(成对检验 P>0.05) 。但手工研磨有较大的样本损失率,对于DNA提取浓度较低的样品来说,自动研磨仪可以做到样品0损失,在DNA提取上有着明显的优势,且手工处理的过程复杂、易交叉污染,操作所用时间等方面均不及TL2010S自动研磨仪,因此自动研磨仪对于DNA提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。
本文关键词:自动研磨仪,研磨仪,DNA提取
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