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激光诱导荧光检测器

毛细管电泳(CE)

  • 请教各位,在下第一次用激光诱导荧光检测器,为什么总是提示LIF PMT background too high?什么是PMT?
  • 该帖子已被版主-nini2006加5积分,加2经验;加分理由:发帖鼓励
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  • v2812644

    第1楼2013/12/03

    是不是需要毛细管充满水?

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  • nini2006

    第2楼2013/12/04

    PMT 是光电倍增管

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  • nini2006

    第3楼2013/12/04

    你的背景太高了,找找溶液的原因,溶液没有问题就有可能是设置出来了问题。看看在光波长设置或者光路filter通道是否有问题。

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  • lkqzpp

    第4楼2013/12/04

    太感动了,版主居然在凌晨零点给我回了帖!!!快过年了,祝愿做毛细管电泳的同学们都实验顺利啊!

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  • lkqzpp

    第5楼2013/12/04

    谢谢你,我昨天试了,好像不是这个原因,不过还是非常感谢你的回帖帮助!

    v2812644(v2812644) 发表:是不是需要毛细管充满水?

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  • lkqzpp

    第6楼2013/12/04

    我想做间接激光诱导荧光实验,要测的物质没有荧光,在背景缓冲溶液磷酸盐(之前用紫外检测器出的峰挺好就是灵敏度太低)溶液中每100毫升加了1毫克的荧光素钠,然后每次都提示PMT 背景过高,换了不含荧光素钠的溶液就没有这个提示了。是不是荧光素钠浓度我配的太高了,原以为100毫升中加1毫克浓度已经很低了,一般做间接实验荧光素钠大概配多少浓度呢?

    另外还想请教版主,我用的贝克曼的仪器,instrument setup中有三项1,initial conditions 2,LIF detector initial conditions 3,time program,在第二项窗口右下角有两个选项relay1和relay2这是什么意思?一般是选off还是on?

    谢谢!

    nini2006(nini2006) 发表:你的背景太高了,找找溶液的原因,溶液没有问题就有可能是设置出来了问题。看看在光波长设置或者光路filter通道是否有问题。

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  • v2812644

    第7楼2013/12/04

    那么现在原因就很清楚了,是你的背景荧光值太高了。100mL中间加入1mg,浓度相当于10ppm,对于荧光来说非常高啊,我建议至少稀释10倍以上看看。

    relay我的印象off/on没啥关系的

    lkqzpp(lkqzpp) 发表:我想做间接激光诱导荧光实验,要测的物质没有荧光,在背景缓冲溶液磷酸盐(之前用紫外检测器出的峰挺好就是灵敏度太低)溶液中每100毫升加了1毫克的荧光素钠,然后每次都提示PMT 背景过高,换了不含荧光素钠的溶液就没有这个提示了。是不是荧光素钠浓度我配的太高了,原以为100毫升中加1毫克浓度已经很低了,一般做间接实验荧光素钠大概配多少浓度呢?

    另外还想请教版主,我用的贝克曼的仪器,instrument setup中有三项1,initial conditions 2,LIF detector initial conditions 3,time program,在第二项窗口右下角有两个选项relay1和relay2这是什么意思?一般是选off还是on?

    谢谢!

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  • lkqzpp

    第8楼2013/12/04

    呵呵,现在觉得仪器挺可爱的,我稀释了10倍,它还提示too high, 又稀释了3倍还是告诉我too high,直接稀释了300倍,这下它觉得差不多了不再提示了程序跑下去了。

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  • nini2006

    第9楼2013/12/04

    问题解决了就好,加油!

    lkqzpp(lkqzpp) 发表:呵呵,现在觉得仪器挺可爱的,我稀释了10倍,它还提示too high, 又稀释了3倍还是告诉我too high,直接稀释了300倍,这下它觉得差不多了不再提示了程序跑下去了。

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  • nini2006

    第10楼2013/12/04

    我是夜猫子,晚上才是我“不务正业”的时间,也祝你实验顺利,回家过个好年!

    lkqzpp(lkqzpp) 发表:太感动了,版主居然在凌晨零点给我回了帖!!!快过年了,祝愿做毛细管电泳的同学们都实验顺利啊!

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