毛细管电泳-间接激光诱导荧光

你说的原理是对的。但是不理解你说的“在同一个体系跑CZE-间接激光诱导荧光,发现出的色谱图相同”。是出峰时间都一样吗？

跟间接紫外法类似，如果数据不加处理你应该都看到倒峰，只是迁移时间不一样。

楼主检测的是什么样品？

1 直接法，仪器贝克曼PA800，背景缓冲溶液20mM硼酸钠，pH8.5,电压20Kv,未涂敷毛细管内径75微米有效长度38.2厘米，荧光检测器488纳米激发520纳米，四个样品瓶里分别是空白，10mM黄曲霉毒素，10mM赭曲霉毒素，10mM伏马毒素，四个物质在该条件下跑电泳都没有峰，是不是可以认为这四个物质在该条件下都没有荧光？然后就考虑用间接法

四个样品瓶里分别是空白，10mM黄曲霉毒素，10mM赭曲霉毒素，10mM伏马毒素，三个样品都是用乙腈水体积比10比90溶解的。这几个毒素本身在300多纳米激发400多纳米时是有荧光的。我们的检测器时488激发520，跑的时候没有峰。见附件

图贴上来了就好多了。建议你先用气压推一下，看看有没有荧光。还有如果是自身带荧光的话不知道荧光强度怎么样，纵坐标不要拉的太大。另外也有可能只是在488波长不受激发没有荧光。然后在考虑用间接法。间接法在Beckman的方法设置里有个勾选，勾上以后负峰会变成正峰的。

lkqzpp(lkqzpp) 发表:

1 直接法，仪器贝克曼PA800，背景缓冲溶液20mM硼酸钠，pH8.5,电压20Kv,未涂敷毛细管内径75微米有效长度38.2厘米，荧光检测器488纳米激发520纳米，四个样品瓶里分别是空白，10mM黄曲霉毒素，10mM赭曲霉毒素，10mM伏马毒素，四个物质在该条件下跑电泳都没有峰，是不是可以认为这四个物质在该条件下都没有荧光？然后就考虑用间接法

2 间接法，其他条件同上背景缓冲溶液中加了3×10^-7M的荧光素钠，四个样品出的峰都是一样的,2.6分钟左右有一正峰，3.0分钟左右有一小负峰。

首先呢，这几种毒素都是有自身荧光的。但是具体的检测波长需要搜索一下文献的，几种物质不一样的。

第二呢，这几种物质自身好像都不带电，应该要用MEKC或者其他手段才可以分开。

第一张图完全不是没有峰的样子，而是好像检测器灯根本没打开的感觉。不然，好歹会有点基线起伏。

第二张图里面的那个大峰，不想是样品峰，而像是溶剂峰，那个倒峰也是很常见的鬼峰而已。你试试用你样品的溶剂进样测试一下，看看有没有峰就知道这个是否是你的样品峰了。

如果那个大峰就是你的样品峰，那说明你这四个物质没有分开，想想办法如何把它们分开吧

说得不错，毛细管电泳是依靠不同样品的质荷比不同进行分离。如果是物质都是中性的，那就不能简单用CZE模式了。