显微图像的标定

显微图像标定操作规程

细胞大小和长短是浮游生物重要的形态特征，见图1，常常需要测量细胞粒径作为种类鉴别的依据。定量分析同样需要准确测量视野面积来计算单位体积的浮游生物数量。显微镜通过CCD接电脑后，测量和分析是针对电脑中的图像来的，必须精确确定被拍摄样本的实际尺寸与所获取的图像尺寸之间的关系，这种尺寸关系的确定由标定来完成。

图1

标定方法：

1. 连接好显微镜和仪器主机，打开显微图像分析系统。

2.将台测微尺当作显微玻片标本，点击“连接”，见图2 。 图2

用4倍物镜观察并调整直至图像清晰，图3。台尺的刻度代表标本的实际长度，本次使用的测微尺小格为0.01mm。

图3

3.点击“人工拍摄”，获取测微尺图像。图4 .

图4

4.点击屏幕右下角的标定选项，选择需要标定的比例尺。此次图像是4倍物镜形成，选择“4x”。在测微尺图像上确定两点的距离,在弹出的对话框中输入图像中线段的实际长度。

图5

图6

5.点击“确定”，完成本次标定。

6.重复2.-6.步骤，用10倍和40倍物镜拍照后标定。

标定图像

观察实际样品时，获得清晰图像后，选择物镜倍数，点击选择显示比例尺，选择“单张固化”或“全部固化”可以将生成的比例尺嵌入单张图像上或嵌入到获取的所有图像上。