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【每周读报】基于核酸适配子毛细管电泳分析技术的肝癌诊断新方法

  • wy20071722
    2014/01/06
  • 私聊

毛细管电泳(CE)

  • 以下转自http://gi.cmt.com.cn/detail/253665.html



    基于核酸适配子毛细管电泳分析技术的肝癌诊断新方法



    目的 在前期工作中我们筛选出一批针对肝癌血清特异的核酸适配子毛细管电泳是一种微量分析技术。本研究旨在建立一种基于毛细管电泳技术的核酸适配子与血清结合程度的分析方法,为适配子在肝癌诊断中的应用提供一种简便有效的新方法。

      方法 人工合成5’端FAM标记的核酸适配子;将等差梯度浓度的适配子溶液进行毛细管电泳,以确定适配子的合适用量;将合适用量的适配子与等差梯度体积的肝癌混合血清孵育后进行毛细管电泳,以确定血清标本的合适用量;以适配子的合适用量为中心,将梯度浓度的适配子分别与合适用量的肝癌混合血清和正常混合血清孵育及检测,确定最佳的适配子用量;重复性试验分析毛细管电泳检测适配子与血清结合程度的精确性;以最佳的适配子用量与血清用量为条件进行临床标本检测,评价其对肝癌的诊断价值。

      结果 本研究以适配子AP-HCS-9-90为模型,确定的最佳适配子用量为0.9pmol,合适的血清标本用量为1ml,毛细管电泳检测适配子与血清结合程度的重复性良好。以上述优化条件检测了41例肝癌血清标本和34例正常血清标本。适配子与血清孵育后毛细管电泳可显示A、B、C三个峰。肝癌血清标本的A、B、C峰面积分别为77949±158035、1328940±1882435、49909±9481,正常血清标本的A、B、C峰面积分别为15273±21043、377308±680039、50178±6868,两组间以B峰面积差异具有极显著性意义(t=3.009, P=0.004),A峰面差异有显著性意义(t=2.513, P=0.016),C峰面积差异无统计学意义(t=0.138, P=0.891)。B峰的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.869,诊断肝癌的敏感度为82.9%,特异度为79.4%,准确度分别为81.3%。多因素Logistic回归分析建立诊断模型,诊断价值可进一步提高,AUC为0.885,诊断肝癌的敏感度为90.2%,特异度为82.4%,准确度为86.7%。

      结论 成功创建起基于毛细管电泳技术的核酸适配子与血清结合程度的检测方法,并在基于核酸适配子的肝癌诊断中具有良好的价值。
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  • wy20071722

    第1楼2014/01/06

    核酸适配体是一种能够特异性与靶标结合的DNA序列,主要通过二级、三级折叠形成一定的空间结构与靶标产生分子间相互作用。目前国内对核酸适配体的研究越来越多,核酸适配体在药物方面的研究也在逐步展开。利用毛细管电泳用于核酸检测简单快速的优势,将其用于核酸适配体的研究能够加快适配体研究的进度。

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  • nini2006

    第2楼2014/01/06

    wy20071722版主动作蛮快,给力,我稀饭!

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  • 老多_小多

    第3楼2014/01/06

    有点深奥啊,是通过检测核酸适配子的变化来诊断么

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  • nini2006

    第4楼2014/01/06

    是的,这个检测方法有点象检测蛋白质与药物的结合,最终要算出一个结合率出来。算是对癌症诊断方法的一个补充,但个人觉得没多大实际用途,因为现在癌症诊断的方法很多也很成熟,其中许多诊断方法又快又准又简单。

    老多_小多(emoc98311) 发表:有点深奥啊,是通过检测核酸适配子的变化来诊断么

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  • wy20071722

    第5楼2014/01/06

    定位很准确啊,适配体本身用于已经很成熟的检测,需要有更多的优势才能得到推广,否则只是多了一种方法而已。而结合毛细管电泳这种方法的话,毛细管电泳仪器也不是常人能有的仪器,需要一定的设备条件,技术上也没什么创新,算是一个补充吧。如果适配体能像测孕纸一样做成试纸检测癌症,就很方便了!想毛细管电泳仪如果能降成本,小型化,辅以标准化的测试方法,也会推广的很快的!

    nini2006(nini2006) 发表:是的,这个检测方法有点象检测蛋白质与药物的结合,最终要算出一个结合率出来。算是对癌症诊断方法的一个补充,但个人觉得没多大实际用途,因为现在癌症诊断的方法很多也很成熟,其中许多诊断方法又快又准又简单。

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  • ericwong

    第6楼2014/01/07

    要不怎么会有微流控芯片的发展,虽然现在仍然很不成熟,不过目标就是微型化

    wy20071722(wy20071722) 发表:定位很准确啊,适配体本身用于已经很成熟的检测,需要有更多的优势才能得到推广,否则只是多了一种方法而已。而结合毛细管电泳这种方法的话,毛细管电泳仪器也不是常人能有的仪器,需要一定的设备条件,技术上也没什么创新,算是一个补充吧。如果适配体能像测孕纸一样做成试纸检测癌症,就很方便了!想毛细管电泳仪如果能降成本,小型化,辅以标准化的测试方法,也会推广的很快的!

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  • nini2006

    第7楼2014/01/08

    不一定要很微型,便携式的更好。其实也已经有便携式的了,只是好用与否就不得而知了。

    ericwong(ericwong) 发表:要不怎么会有微流控芯片的发展,虽然现在仍然很不成熟,不过目标就是微型化

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  • ericwong

    第8楼2014/01/10

    对于癌症诊断技术来说,我觉得其实没有必要开发便携式的仪器。有几个人会在野外去进行癌症的诊断呢?
    要关注的问题应该是:专一性、灵敏度、仪器的操作简便性(最好是傻瓜型的)

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