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叶绿素的测定,我达不到规范上的要求

  • 东北生长的苹果
    2014/01/21
  • 私聊

水质检测



  • 我用的是水利的叶绿素测定规范。

    要在-40度的冰箱里折腾三次,这把我的手给冻的。

    注意看11.4和11.5,我的750波长吸光度值超过了0.005,而664波长的吸光度值根本达不到0.1,至于再将提取液稀释或者更换比色皿,我就更不明白了。
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  • 谁折腾

    第1楼2014/01/21

    应助达人

    对于750nm吸光度的规定,主要是担心离心效果不好,提取液浊度会影响测定。不过叶绿素的计算公式中,其他波长处的吸光度要减去750nm处的吸光度后再参加计算,不知水利版的方法是否如此?

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  • 谁折腾

    第2楼2014/01/21

    应助达人

    至于664nm处吸光度的要求,主要考虑采用比色法时,吸光度太小或太大均不利于准确测定;某物质的浓度与吸光度在一定范围内才存在线性关系,超过这个范围,他们的关系就不是原来的比例关系了;
    跟其他比色法测定项目的定量上、下限的含义类似,即采用某标准曲线定量时,当测得浓度在该曲线的定量下限至定量上限间比较可靠。

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  • 快乐鱼

    第3楼2014/01/22

    这个没做过,暂时就不发表看法了

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  • 东北生长的苹果

    第4楼2014/01/22

    我的滤膜不是玻璃纤维滤膜,而且离心管是塑料的,所以溶液有些混浊,下个月打算换一下试试。

    谁折腾(yzhlai) 发表:对于750nm吸光度的规定,主要是担心离心效果不好,提取液浊度会影响测定。不过叶绿素的计算公式中,其他波长处的吸光度要减去750nm处的吸光度后再参加计算,不知水利版的方法是否如此?

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  • 东北生长的苹果

    第5楼2014/01/22

    这个波长,我无论如何都达不到0.1,我也不知道为什么达不到

    谁折腾(yzhlai) 发表:至于664nm处吸光度的要求,主要考虑采用比色法时,吸光度太小或太大均不利于准确测定;某物质的浓度与吸光度在一定范围内才存在线性关系,超过这个范围,他们的关系就不是原来的比例关系了;

    跟其他比色法测定项目的定量上、下限的含义类似,即采用某标准曲线定量时,当测得浓度在该曲线的定量下限至定量上限间比较可靠。

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  • luckyxiaoyu

    第7楼2014/01/22

    664达不到0.1是因为提取液浓度不高,离心的方法很难做到750小于0.005,我用这个装置分离出来的提取液就很清澈了

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  • 辛妈

    第8楼2014/01/22

    你是不是用的1CM的比色皿?可以更换更大一点的,比如4cm,吸光度肯定会提高的。

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  • 谁折腾

    第9楼2014/01/22

    应助达人

    离心管材质没关系的,主要是离心的转速要大些

    东北生长的苹果(majing04) 发表:我的滤膜不是玻璃纤维滤膜,而且离心管是塑料的,所以溶液有些混浊,下个月打算换一下试试。

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  • 谁折腾

    第10楼2014/01/22

    应助达人

    达不到就改用光程较大的比色皿,比色皿的光程有参与浓度计算,所以不用担心不同样品所用的比色皿不同(Chl a的测定与其他带标准曲线的比色法是不一样的,其他带标准曲线的比色法一般要求保持比色皿的光程不变)

    如不同样间比色皿的光程不同,则应单独计算浓度

    东北生长的苹果(majing04) 发表:这个波长,我无论如何都达不到0.1,我也不知道为什么达不到

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