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吸收波长的选择，求各位大侠分析下全波长扫描图

一个人的翛然

2014/01/25

紫外可见分光光度计（UV）

请教各位大侠，本人需要建立一个紫外的总含量测定方法，现扫描的全波长图如下。吸收值大一点的为药材的吸收图，小一点的为标准品的图。由于加入的显色剂非常大量，造成200-400段的吸收值波动非常大，但是均在427nm处有一个吸收峰。唯一不同的是，药材在479nm处也有一个吸收峰，而标准品没有。现在想选择427nm作为一个检测波长。但是有同学说，此峰峰形并不是太好，也不对称，是一个尖的峰。所以求助各位大侠，帮忙看一下，这种情况，能不能选择这个峰作为检测波长，如果不能，有没有什么方法调整峰形。注：药材和标准品在400-700段是没有吸收的，在紫外下是有吸收。

附件：

5ml水显色剂综合图2.pdf

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wulin321

第1楼2014/01/25

应助达人

这个标准要求怎样的

0

一个人的翛然

第2楼2014/01/25

主要是建立一个方法，做中药中某一类成分总含量测定。
wulin321(wulin321) 发表:这个标准要求怎样的

0

一个人的翛然

第3楼2014/01/25

主要是建立一个方法，做中药中某一类成分总含量测定。
wulin321(wulin321) 发表:这个标准要求怎样的

0

wulin321

第4楼2014/01/25

应助达人

不懂，俺来学习一下
一个人的翛然(v2850162) 发表:主要是建立一个方法，做中药中某一类成分总含量测定。

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夕阳

第5楼2014/01/26

应助达人

我替楼主将测试图谱展现出来：

0

夕阳

第6楼2014/01/26

应助达人

不加显示剂，仅测标准品看看如何？

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tutm

第7楼2014/01/26

从这个图上看，曲线好像测到的噪音干扰很大，问题在哪儿并不容易看出来。

最好先排除仪器问题，扫一条空白基线看看，这些噪音是不是仪器本身的问题。

再看下你的溶液是不是清澈的？如果有悬浮物，则应该沉淀或滤除后测。
夕阳(anping) 发表:我替楼主将测试图谱展现出来：

0

一个人的翛然

第8楼2014/01/30

显色剂的量由于浓度过大，本身在200-400干扰很大，如果减小显色剂的量的话，是没有这种干扰的，但是问题是减小显色剂的量的话，在427nm的那个峰就没有了。空白基线，如果是上图的那个量的显色剂的话，也是跟上图差不多，干扰很大。溶液的话是没有悬浮物的。现在就是不知道，在427nm，也就是上图的1峰，可不可以作为含量测定的检测波长呢？选择这个检测波长，一定要整个图的峰型比较好吗？
tutm(tutm) 发表:从这个图上看，曲线好像测到的噪音干扰很大，问题在哪儿并不容易看出来。

最好先排除仪器问题，扫一条空白基线看看，这些噪音是不是仪器本身的问题。

再看下你的溶液是不是清澈的？如果有悬浮物，则应该沉淀或滤除后测。

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tutm

第9楼2014/01/30

峰尖上好像也有一些尖刺状干扰，这样的峰值做定量应该得不到良好结果的
一个人的翛然(v2850162) 发表:显色剂的量由于浓度过大，本身在200-400干扰很大，如果减小显色剂的量的话，是没有这种干扰的，但是问题是减小显色剂的量的话，在427nm的那个峰就没有了。空白基线，如果是上图的那个量的显色剂的话，也是跟上图差不多，干扰很大。溶液的话是没有悬浮物的。现在就是不知道，在427nm，也就是上图的1峰，可不可以作为含量测定的检测波长呢？选择这个检测波长，一定要整个图的峰型比较好吗？

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tutm

第10楼2014/01/30

还有，你测试时带宽是不是设置得太小了？
设到2nm和4nm分别扫描下，看看峰形和干扰是否会好些。

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