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MEKC 重现性不好

孙艳happy

2014/03/11

毛细管电泳（CE）

最近做胶束毛细管电泳，但是重现性特别不好，缓冲液是20mM 磷酸二氢钠-50mM SDS,pH9.还有10%的甲醇，但是出峰很不稳定~为啥？

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nini2006

第1楼2014/03/11

甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。

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孙艳happy

第2楼2014/03/11

之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？
nini2006(nini2006) 发表:甲醇容易挥发导致buffer性质改变，试试乙腈看。不过不管用哪种有机添加剂，量尽量少，10%稍嫌高了一点。

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nini2006

第3楼2014/03/11

应该有关系的
孙艳happy(v2713325) 发表:之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？

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孙艳happy

第4楼2014/03/11

但是我的物质也有一种不溶于乙腈
nini2006(nini2006) 发表:应该有关系的

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nini2006

第5楼2014/03/11

只要你的样品的溶剂能跟你的buffer互溶就没问题了
孙艳happy(v2713325) 发表: 但是我的物质也有一种不溶于乙腈

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nini2006

第6楼2014/03/11

或者你可以试试borax做buffer，borax对很多物质的溶解度比phosphate好。

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beyond1977

第7楼2014/03/18

应助达人

用缓冲液配样品就不会有这种问题了吧
孙艳happy(v2713325) 发表:之前不加甲醇的时候，电流老是突然降低？是不是和我的物质不溶于水有关？

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dooby

第8楼2014/03/20

是不是溶解度的问题

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孙艳happy

第9楼2014/03/24

恩，我换了硼酸体系
dooby(dooby) 发表:是不是溶解度的问题

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CEcret

第10楼2014/03/24

根本原因还是甲醇的存在，使得你的buffer组成很容易发生变化。甲醇和乙腈都是太容易挥发了。我的建议是：你每做几针，buffer一定要替换新鲜的。

当然如果你的化合物跟管壁作用比较明显，也会导致迁移时间不稳定。这时候采用涂层管，或者动态涂层技术都可以有效改善这种负面相互作用。
孙艳happy(v2713325) 发表:最近做胶束毛细管电泳，但是重现性特别不好，缓冲液是20mM 磷酸二氢钠-50mM SDS,pH9.还有10%的甲醇，但是出峰很不稳定~为啥？

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