要判断会不会析出来很简单吧,你把你溶解后的样品滴入流动相中,看看会会变浑浊就知道了,如果会就不建议进了,会堵柱子的。你的提取物想必成分是很复杂的,正如你想,里面有很多是不需要分析的。最好首先知道要做里面的哪些成分,然后可通过液液萃取,大孔树脂或硅胶柱之类的先纯化一下,再分析了。还有,你这么复杂的成分,只走等度的液相怎么可以,这种情况一般都是走全梯度的才能有说服力吧。C18也不是什么物质都能分析,像一些极性大的就没办法了,还是要知道你要的物质大体是哪一类再去选柱子。蒸干后,重新溶解,用流动相有机相/水=1:1试一下溶解度,然后走全梯度分析,还没有什么峰的话。可能你醇沉的方法不对,分析物都一起沉淀了。
doublezho(doublezho) 发表:手头上有一样品是中药提取物,除了植物药之外还有几味动物药(总共30味中药,动物药4味),醇沉之后沉淀非常多,估计糖分较多,也可能是蛋白质成分较多。
由于样品里边中药成分不详,只是大概知道其中几味中药,把样品醇沉(50%、60%、70%浓度醇沉后都有进样)后取上清液进样,发现除了溶剂峰之外基本没有什么色谱峰。色谱条件基本是30%的乙腈或者甲醇,25cm的迪马C18反向柱。
现在有这些问题请教大家
1中药提取物可以直接过0.45nm膜后进样吗?会堵柱子么?因为醇沉之后沉淀非常多,我担心直接过膜进柱的话会析出沉淀堵柱子
2可以尝试这样吗?把样品水浴蒸干,然后稀乙醇溶解,过膜进柱,可以吗?
3样品进柱之前用什么溶剂溶解对色谱图会有什么区别吗?比如我这个样品,用水做溶剂,那进柱后很可能在流动相中会有所析出,那如果改用乙醇或者甲醇呢?
4中药提取物进样前的前处理有什么指导性的书籍或者资料吗?或者你们平时是怎么做前处理的?
问题比较多,还望大家都能给我些建议,先谢谢啦!