仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >特色服务 > 厂商论坛 > 帖子详情

梯度洗脱需要注意的问题

三人行

2014/06/05

梯度洗脱需要注意的问题

1、要注意溶剂的互溶性，不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶，超出范围后就不互溶，使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时，还可能析出盐的晶体，尤其使用磷酸盐时需特别小心。

2、梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高，以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辨认溶剂杂质峰，因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气，以防止混合时产生气泡。

3、混合溶剂的粘度常随组成而变化，因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小，当二者以相近比例混合时粘度增大很多，此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。

4、每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理，使其恢复到初始状态。需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱，使固定相与初始流动相达到完全平衡。

相关话题

dahua1981

第1楼2014/06/06

应助达人

现在用的最多还是梯度洗脱

1

ECHO007

第2楼2014/06/06

溶剂的互溶性、试剂纯度、粘度和再生处理，都很重要。

0

三人行

第3楼2014/06/06

梯度洗脱遇到的问题也较多。
dahua1981(dahua1981) 发表:现在用的最多还是梯度洗脱

0

wsy18

第4楼2014/06/07

优点与欠缺并存？
三人行(jncxyy2012) 发表:梯度洗脱遇到的问题也较多。

0

wsy18

第5楼2014/06/07

这是导致四元低压受欢迎的条件之一。
三人行(jncxyy2012) 发表:梯度洗脱遇到的问题也较多。

0

三人行

第6楼2014/06/07

四元低压有哪些优势？
wsy18(wsy18) 发表:这是导致四元低压受欢迎的条件之一。

0

wsy18

第7楼2014/06/07

主要是操作方便，流动相、冲洗液等可以一起上。
三人行(jncxyy2012) 发表:四元低压有哪些优势？

0

三人行

第8楼2014/06/07

流动相和冲洗液用同一个通道比较好吧。
wsy18(wsy18) 发表:主要是操作方便，流动相、冲洗液等可以一起上。

0

wsy18

第9楼2014/06/07

反正可以有四种试剂，如何最合理就看你自己调配了。
三人行(jncxyy2012) 发表:流动相和冲洗液用同一个通道比较好吧。

0

逆天一棍

第10楼2014/06/08

梯度洗脱的重现性是个问题，另外，对于用过别的品种的色谱柱，可能出现不必要的干扰峰。

0

查看更多

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...