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lc-dad上面的醛酮问题

液相色谱(LC)

  • 我们使用的是安捷伦1200系列的lc-dad,柱子是XDB-C18:3.5um,150mm*2.1mm

    目前相分离醛酮-DNPH混标(8组分)

    按照国标的方法60%乙腈40%水的就是一起出来不能 分开!

    1是我们的柱子短了吗?每个人家都是250mm*4.6mm,5um!

    2是我们的流动相比例不好求大虾给个流动相

    3柱子是新换的

    出的dad图如下面
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  • 老多_小多

    第1楼2014/08/14

    进了多少样品,进少点样品量有改善么,好像你的溶剂效应比较明显,要么把溶剂改改,要么就改改流动相

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  • 武灵

    第2楼2014/08/14

    待分离的组分太多,柱子长对你分离有更大的帮助的,你可以试试250cm的柱子

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  • bingwang228

    第3楼2014/08/15

    应助达人

    标准号是什么?标准上的柱子规格型号是什么?型号不一样,流动相条件肯定是要优化的

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  • vince1234

    第4楼2014/08/17

    柱子SB-C18 膜厚5um 250mm*4.6mm

    bingwang228(bingwang228) 发表:标准号是什么?标准上的柱子规格型号是什么?型号不一样,流动相条件肯定是要优化的

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  • bingwang228

    第5楼2014/08/18

    应助达人

    柱子不一样,肯定不能按照标准的流动相来做。可以调节流动相比例,或者按照还标准规格的色谱柱尝试一下

    vince1234(vince1234) 发表:柱子SB-C18 膜厚5um 250mm*4.6mm

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  • daishu123

    第6楼2014/08/19

    1 柱子没问题的
    SB-C18 和XDB-C18填料的保留行为差别不大。
    而且150mm的3.5um的柱子的柱效也够了,和250mm的,5um柱子差不多
    2 进样量的问题
    窄径柱的进行量很小,你这个柱子的进样量不要要比4.6的柱子小的多。一般建议2.1mm的柱子进样不超过5ul.但是我试过即使进到十几微升也可以的
    3 最有可能的原因
    样品的溶剂太强,一是样品里面的有机相太高,而是样品的酸碱性太强。在4.6mm的柱子上可能没问题,在2.1mm上就可能有。

    将样品用流动相稀释一下,然后降低进样体积到5uL试一下

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  • 微微一笑123

    第7楼2014/08/19

    首先,你这款色谱柱是可以做出来的,但是由于目前你的样品看起来成分比较多,首先建议你降低进样量1ul,样品用流动相复溶,看检测结果是否有改善。

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  • zy178

    第8楼2014/08/27

    换成甲醇流动相试试看

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  • nixiaolong

    第9楼2014/09/01

    应该是溶剂问题,更换下试试看,或者与流动相保持一致

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  • bingwang228

    第10楼2014/09/01

    应助达人

    可以用单标先做,看出峰的情况,在逐渐混标,优化条件

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