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HPLC怪现象求教

  • wonderful899
    2014/09/05
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 近两天,我在做实验的的时候,有个问题一直搞不明白,还请各位大侠指点。

    色谱条件:岛津LC-15C二元泵、SPD-15C紫外检测器、CTO-15C柱温箱,AD-H 250×4.6nm5μm30℃,流动相n-HEX:IPA=50:50,检测波长254nm。

    样品出峰,下降至一半,走平,只有通过低浓度醇高流速才能将基线跑平。

    (1)出峰前,始终有个一上一下的峰,不同的样品、流动相比例、流速均会出现,这是为什么?

    (2)样品出峰为什么不能回零?

    谢谢!


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  • hujiangtao

    第1楼2014/09/05

    应助达人

    感觉是没洗下来呢

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  • 浪淘沙隐

    第2楼2014/09/05

    对于正相方法,如果样品是酸性的,那么在流动相中加入三氟乙酸,如果样品是碱性的,那么在流动相中加入二乙胺或乙二胺,这样才能保证有好的峰形。如果样品是中性的,发现了这样的情况,也可以尝试在流动相中加点酸或碱,有可能会调整峰形。

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  • 浪淘沙隐

    第3楼2014/09/05

    另外,建议楼主改变你的色谱数据的路径,不要将其保存在C盘,否则迟早会后悔。

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  • 浪淘沙隐

    第4楼2014/09/05

    还有,hex:ipa=50:50,压力色谱柱能承受的住吗?

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  • wonderful899

    第5楼2014/09/05

    样品是碱性的,手头只有三乙胺,已经按千分之一加在正己烷中。

    另外,因为电脑硬盘没有分区,数据确实都是放在C盘。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:对于正相方法,如果样品是酸性的,那么在流动相中加入三氟乙酸,如果样品是碱性的,那么在流动相中加入二乙胺或乙二胺,这样才能保证有好的峰形。如果样品是中性的,发现了这样的情况,也可以尝试在流动相中加点酸或碱,有可能会调整峰形。

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  • wonderful899

    第6楼2014/09/05

    0.6mL/min,柱压在3-4左右,按说明书,此柱子不超过5Mpa即可。

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:还有,hex:ipa=50:50,压力色谱柱能承受的住吗?

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  • bingwang228

    第7楼2014/09/05

    应助达人

    放C盘太不安全。将硬盘进行分区或加装硬盘,防止数据丢失,或者及时将数据导出

    wonderful899(wonderful899) 发表:样品是碱性的,手头只有三乙胺,已经按千分之一加在正己烷中。

    另外,因为电脑硬盘没有分区,数据确实都是放在C盘。

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  • wonderful899

    第8楼2014/09/05

    谢谢您的提醒!

    bingwang228(bingwang228) 发表:放C盘太不安全。将硬盘进行分区或加装硬盘,防止数据丢失,或者及时将数据导出

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