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液相测呕吐毒素标品和样品出峰时间不一致

Ins_cee6bd4c

2023/06/14

液相色谱（LC）

柱子：Inertsil ODS-3 ，5um， 4.6mm*250mm 第一次测：流速0.8；流动相20%甲醇水；柱温：35℃，标品和样品出峰均严重拖尾（时间跨度6-7min），出峰时间11-12,min；中途改流速1.0；柱温30℃，还是拖尾；后来改流动相甲醇25%，水75%，流速1.0，柱温室温（28℃），标准品出峰正常，峰型也很好，出峰时间9-10min，但是样品出峰时间还是11min，请教各位大神这是什么情况，如何改善

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歌名

第1楼2023/06/14

应助达人

做一下样品加标看看，然后可以的话把图贴出来看看，看你的描述我觉得峰宽可能比较宽

0

xiaolanzi5

第2楼2023/06/14

应助达人

用的什么前处理净化？

0

Ins_cee6bd4c

第3楼2023/06/15

免疫亲和小柱，前处理同国标一样，不同的是取样量与提取液按比例缩小了
xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:用的什么前处理净化？

0

Ins_cee6bd4c

第4楼2023/06/15

歌名(Ins_eedcdc41) 发表:做一下样品加标看看，然后可以的话把图贴出来看看，看你的描述我觉得峰宽可能比较宽

0

Ins_cee6bd4c

第5楼2023/06/15

样品峰宽在横轴上横跨6min左右，加标样和样品一样出峰时间靠后，同样拖尾，与标品出峰时间不一样我也没法定量
歌名(Ins_eedcdc41) 发表:做一下样品加标看看，然后可以的话把图贴出来看看，看你的描述我觉得峰宽可能比较宽

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歌名

第6楼2023/06/15

应助达人

你这..............................贴的是标的色谱图吗？这都没峰型呀大哥，，，，重新优化一下方法吧，跑呕吐毒素流动相用乙腈-水或者甲醇-水都行，随便拉个梯度都可以，甲醇水出峰应该是早一点点。样品的话需要用免疫亲和柱或者免疫磁珠净化
Ins_cee6bd4c(Ins_cee6bd4c) 发表:

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Ins_cee6bd4c

第7楼2023/06/20

不是，这是样品峰，样品加标也是这样，标品9min左右出峰很好，并且线性也可以，我的问题就是样品峰的问题，样品峰不但拖尾，出峰时间还和标品不一样，流动相用的就是甲醇水，具体的色谱条件我前面写的有
歌名(Ins_eedcdc41) 发表: 你这..............................贴的是标的色谱图吗？这都没峰型呀大哥，，，，重新优化一下方法吧，跑呕吐毒素流动相用乙腈-水或者甲醇-水都行，随便拉个梯度都可以，甲醇水出峰应该是早一点点。样品的话需要用免疫亲和柱或者免疫磁珠净化

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