目标峰分离不开

应助达人

冲洗色谱柱或者换根色谱柱试试

要想将两个峰分开，就需要减少有机相比例，而楼主你却增加了比例，这是南辕北辙啊。

谢谢您的回复呀亲，每次我们做完实验都会冲洗柱子2个小时左右呢，柱子也算是挺好的

谢谢亲的回复呢。比例是降到3：97过了的可是结果还是分不开，是不是仪器问题呢？我们用含测的仪器是waters的而且没柱温箱，谢谢回复

额，楼主你么有看清楚2楼的回复。。。另外，磷酸盐浓度貌似对保留时间没有影响吧

嘿嘿不好意思哈流动相反了，是乙腈-磷酸3：97

不知道楼主用的什么牌子的HPLC，7min的保留时间很短的，这样短的RT有峰不能分开很正常的。实在不行换跟水性柱，不要有机相，试试看。或者换其他的色谱柱试试。

每个样品前面先走个空白试试看？
减少进样量试试看，比如从20μL改成10μL。

流动相是否有变化，温度变化或者色谱柱没有平衡！