梯度变化对柱子的影响

应助达人

对于冲柱子，含有缓冲盐，建议用大比例的水长时间冲洗，最后用大比例有机相（如90%~100%甲醇）保存，这个冲洗时间可以缩短。
对于不含缓冲盐的流动相，可将大比例的水冲洗时间缩短

应助达人

缓冲盐不太严重的情况下，没有必要清洗太长时间，特别是甲醇：水=1:1时系统压力会增高，对系统和色谱柱多少不利，水冲色谱柱容易造成键合相流失。

那么一般多久合适呢，我感觉我把时间拉的这么长主要是因为想在中间弄个过度的时间，你看这个需要吗

应助达人

根据系统的使用情况，如果是正常使用，清洗时间可以适当缩短，没有时间国定之说。

不清楚楼主的缓冲盐的浓度
如果是含有缓冲盐的流动相，刚开始冲洗时，水相可以加大到90%，按柱体积的20倍冲洗，然后再逐级换成有机相比例高（大于70%）的流动相保存柱子
不过用到缓冲盐的柱子，一般不可以用很长时间的了，即使是平常注意冲洗和保养，柱效液会慢慢下降的

应助达人

用到缓冲盐时可以适当延长第一步的时间，然后用大比例或者纯有机溶剂冲洗并保存，个人感觉中间不需要这么漫长的过渡，直接过渡就可以了

应助达人

系统可以用纯水冲洗，但是需要将色谱柱卸下来后再冲，一般色谱柱都不能耐纯水

应助达人

第一步时间可以长一些，想要过渡可以设置5~10min，直接从初始流动相变为纯有机相

没有缓冲盐问题不大