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求助这个基线情况是出了什么问题

液相色谱(LC)

  • 求助各位老师,今天跑岛津高效,出现下图的情况,,270nm,1ml/min,进的是10微升乙腈,梯度洗脱乙腈:50mM磷酸二氢钾溶液,0~10min 无机相95%~85%,10~30min 85~76%,40~48min 76~66%,48~53min 66%,53~60min 66%~95%.基线上升然后直线下降,是出什么问题了?
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  • 有水有渝

    第1楼2016/10/26

    应助达人

    看一下压力波动情况,有没有气泡,是高压梯度还是低压梯度,必要时做一个梯度误差检验。

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  • 浪淘沙隐

    第2楼2016/10/26

    这么高的缓冲盐浓度,岛津那个“小心脏”是受不了的。换个高压泵做,或者换A家或W家的仪器做。

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  • p3152645

    第3楼2016/10/26

    气泡应该没有吧,用纯乙腈冲柱子的时候能冲平,1mL/min压力在15Mpa的样子,但有时会突然变高或变低,变高变低后波动在0.3Mpa左右,过一段时间又会有大的波动。现在发现用0.4mL/min冲柱子压力会缓慢上升,我觉得可能是在线过滤器、单向阀或混合器有一点堵,现在除了混合器本体其他部件包括预混合室过滤芯都在超声,顺便还把乙腈也过滤了一遍,待会看看效果。

    有水有渝(xky0230699) 发表:看一下压力波动情况,有没有气泡,是高压梯度还是低压梯度,必要时做一个梯度误差检验。

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  • p3152645

    第4楼2016/10/26

    请问岛津适合的盐浓度范围大概多少啊?20~30mM可以吗?我之前用0.1%的磷酸溶液,发现岛津的基线总往下飘,换成磷酸盐就能冲平,是不是岛津不适合用磷酸溶液作无机相啊?

    浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:这么高的缓冲盐浓度,岛津那个“小心脏”是受不了的。换个高压泵做,或者换A家或W家的仪器做。

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  • 夏天的雪

    第5楼2016/10/26

    应助达人

    走梯度压力有波动是正常的,单向阀维护一下看看效果

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  • 浪淘沙隐

    第6楼2016/10/27

    岛津不适合磷酸盐体系倒不至于。只是因为岛津的低压泵性能不是很好,如果缓冲液的浓度过高,混合效果就差,表现出来的情况就是压力不稳,出峰不正常。至于多大浓度就不行,这我没有去试验。

    p3152645(p3152645) 发表: 请问岛津适合的盐浓度范围大概多少啊?20~30mM可以吗?我之前用0.1%的磷酸溶液,发现岛津的基线总往下飘,换成磷酸盐就能冲平,是不是岛津不适合用磷酸溶液作无机相啊?

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  • 有水有渝

    第7楼2016/10/27

    应助达人

    冲柱子的时候你用的是单通道,跟梯度用的是多通道没有可比性,另外岛津的单向阀使用纯乙腈的时候工作不稳定。如果是稳定的堵塞只是压力维持在高位,并不会有压力的波动,压力波动最可能的原因就是单向阀工作不良,打开或关闭不全。

    p3152645(p3152645) 发表: 气泡应该没有吧,用纯乙腈冲柱子的时候能冲平,1mL/min压力在15Mpa的样子,但有时会突然变高或变低,变高变低后波动在0.3Mpa左右,过一段时间又会有大的波动。现在发现用0.4mL/min冲柱子压力会缓慢上升,我觉得可能是在线过滤器、单向阀或混合器有一点堵,现在除了混合器本体其他部件包括预混合室过滤芯都在超声,顺便还把乙腈也过滤了一遍,待会看看效果。

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  • lijing320323

    第8楼2016/10/27

    平衡时应该按照乙腈:缓冲液的初始比例冲洗平衡

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  • 老多_小多

    第9楼2016/10/27

    应该是梯度变化造成的

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  • 牛一牛

    第10楼2016/10/27

    应助达人

    盐的pH是多少?是不是忘记调节pH了,buffer的酸碱性对这种结构影响很大。

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