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紫外可见分光光度计的操作步骤

礼锦浣

2015/05/03

紫外可见分光光度计（UV）

我们以UV-3150PC紫外可见近红外分光光度计为例讲述光谱仪器的性能和操作方法。
　　1、插上电源，打开光度计前面的电源开关。
　　2、双击计算机桌面UVProbe图标，打开UVProbe软件，点击UVProbe中“Connect”图标联机，出现自检画面。
　　3、如自检完全部绿灯亮，则点击“OK”进入系统。若出现红灯亮，可关掉光度计重新连接，若仍未通过自检，应立即报告仪器负责老师。
　　4、完全通过并进入系统，出现UVProbe菜单栏和工具栏。UVProbe有四大主要模块，包括光谱扫描模块、光度测量模块、时间扫描模块和报告生成器。每种模式都可以直接点击后面的方法设定按钮设置方法。
　　5、点下光谱扫描图标，出现光谱扫描界面。
　　6、点击方法按钮，出现方法设置对话框。在此可以设置扫描波长范围，仪器的最大范围为3200～190nm。可以设置扫描速度，一般可选中速(Medium)或快速(Fast)进行扫描。采样间隔表示光度计每隔多少nm读一个吸光度值，如没有特殊要求，选择自动即可。可选择是否重复扫描曲线，若重复则设置重复次数和间隔时间。
　　7、点击“Sample Preparation”输入样品信息。包括样品的质量、体积、稀释倍数和测量光程等。也可以输入样品的其他信息。
　　8、点击“Instrument Parameters”设置测量方式和仪器的一些参数。在测量模式中可选择“Transmittance(透过率)”、 “Absorbance(吸光度)”、“Energy(能量)”和“Reflectance(反射)”，其中Reflectance一般用积分球测定固体样品时使用。狭缝设置在3200～800nm下设为5nm，在800～190nm设为2nm。若包括这两个范围的波长如1500～500nm则选择狭缝为 5nm。
　　9、换灯和检测器可根据所测样品进行设置，换灯在393～282nm范围内任意值均可，换检测器在895～750nm 范围内任设一个值即可。但换灯和检测器由于仪器进行机械的移动，会造成信号波动较大，称仪器噪音大，此时所得扫描曲线误差较大，所以所设波长应该避免在样品吸收峰位置以免影响测定值。
　　10、所有参数设置完成后，两个样品架均不放置样品或两个均放上同样的空白溶液，点击“Baseline”，开始进行基线校正，仪器扫描完成后，点击“λGoToWL”将波长转到750nm，点击“Auto Zero”把750nm的波长设为0。点击“Start”再次扫描，若得出曲线最值均小于0.001，则认为基线平坦，若数值较大，则将750nm吸光度设为0重新进行基线扫描。
　　11、基线校正完成后，取出样品架的空白溶液，放入样品溶液，点击“Start”开始扫描曲线。扫描完成后，出现保存路径框和文件名框，设置好后出现扫描曲线。
　　12、曲线扫描完成后，在谱图上点击鼠标右键，出现快捷菜单。点击“AutoScale”可是软件自动调节图像坐标使之适合扫描所得数据。点击 “Cross Hair>Display”鼠标显示为交叉线，用鼠标将交叉线放到曲线上某点即可显示该点的波长和吸光度值。
　　13、点击“Label”可以在谱图上添加标签，可在其中输入文本以标记谱图。点击“Legend”出现各数据保存图，若在前面框里勾选该光谱数据，则在左面重叠图上显示其曲线。
　　14、若从右键快捷菜单中选择“Customize(自定义)”，可以自定义曲线显示颜色还可定义坐标轴的数值。
　　15、得出曲线后可以对谱图进行一系列的处理。
　　(1)点击“DataPrint(显示数据)”图标可以将谱图曲线直接显示为数值。
　　(2)点击“Manipulate(运算)”图标，可以进行加减乘除、差谱、扣除空白、倒数光谱、对数光谱等处理。
　　(3)点击“PeakPoint(显示峰值)”按钮显示“波峰”和“波谷”的数值。
　　(4)点击“PointPick”图标，输入要显示的波长值，立即显示出所输入波长处的吸光度值。
　　(5)点击“PeakArea”，设定峰阈值，即显示大于此阈值的峰区域。
　　(6)点击“Sewingbox(裁缝)”图标，可以进行谱图的裁剪和缝合。
　　16、曲线扫描完成后数据实际直接保存在内存中，并没有保存到硬盘上，此时若关闭窗口，电脑会提示“Some Spectrum data has not been saved!Do you still want to exit and lostunsaved change?(还有光谱数据尚未保存，你是要离开而不保存数据吗?)”选择“No”返回主界面保存所有数据。

分
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qianguiyun1

第1楼2015/05/03

应助达人

内容比较详细，不过每一种分光光度计得操作步骤是不一样的

0

荆棘鸟fiona

第2楼2015/05/05

这篇介绍的哪一种呀？
qianguiyun1(qianguiyun1) 发表:内容比较详细，不过每一种分光光度计得操作步骤是不一样的

0

荆棘鸟fiona

第3楼2015/05/05

这篇介绍的哪一种光度计呀？

0

礼锦浣

第4楼2015/05/05

UV-3150
原文由v2648817发表：这篇介绍的哪一种光度计呀？

0

礼锦浣

第5楼2015/05/05

UV-3150PC
原文由v2648817发表：这篇介绍的哪一种光度计呀？

0

qianguiyun1

第6楼2015/05/05

应助达人

他上面不是说了吗？
荆棘鸟fiona(v2648817) 发表: 这篇介绍的哪一种呀？

0

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