b. 密封圈。除了提到密封圈的磨损导致单向阀故障以外,密封圈本身老化,也会导致流动相泄露,压力波动。一般来说,密封圈的寿命跟使用的流动相,是否用缓冲盐等因素都有关系,没有一个明确的建议使用时间。但是对于液相使用者,建议记录密封圈的使用时间,然后再到它寿命80%左右,就提前将其更换,避免其老化后产生的各种问题。 c. 缓冲盐的析出。缓冲盐浓度过高(>100mM),在于有机相混合的时候,有时会出现局部有机相比例过高,导致缓冲盐析出,导致压力波动。这种现象,在四元泵出现的几率比二元泵高。
2. 气泡造成的压力波动
a. 脱气方法的介绍. 脱气的方法多常用的就是整合到液相系统里面的真空脱气机.通过真空泵的工作形成一个真空腔,利用半透膜原理,让流动相中溶解的气体分子透过膜扩散到真空腔中,被真空泵抽走.
4. 管路接头泄漏造成压力波动 a. 泄漏的检查。一般要检查泄露,都建议用水(因为不容易挥发)作为流动相,用吸水纸来检查。 b. 管路接头的泄露如何产生。除了没有拧紧以外,接头的不匹配是很多情况下出现泄露的原因。不同公司的接头,规格往往不同,如果混用,就有可能造成下图中的后果。一是漏如图(b), 二是死体积如图(c). 这往往出现在色谱柱的前端接头处,因为这是最容易出现混用的地方,有时候甚至会出现接头卡在色谱柱上取不下来的情况。 c. 如何预防? 首先是使用与色谱柱配套的接头(同一公司或品牌);使用PEEK(聚醚醚酮)接头。 长PEEK接头加上不锈钢管路,加上男生手拧,可以耐压到400bar以上。
7. 造成保留时间漂移的其他原因 a. 流动相。比如流动相pH值的变化或者挥发,导致保留时间的变化。 b. 混合比例。比例阀的故障,最容易导致保留时间的变化 c. 温度。一般来说,分离的问题变化一个摄氏度,保留时间可能变化1%到3%。所以强烈建议要使用柱温箱,而且要使用流动相预加热的柱温箱。 d. 色谱柱。色谱柱老化也是保留时间变化的常见原因之一。