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求助:如何调整流动相梯度使氨基酸混标很好地分离?

  • luxiaoyong
    2015/06/16
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 在下现在在优化液相条件,用流动相为A:10mM甲酸铵水溶液,加0.1%甲酸;B:甲醇:水(95:5),加2mM甲酸铵和0.1%甲酸,测10种氨基酸的混标,试了很多种梯度都不能把样品很好地分开,而且峰形也很差,如图所示是其中一个梯度,实验室师姐之前用过的,我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循,感激不尽!
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  • sukiliang

    第1楼2015/06/16

    峰型不好很正常,我们氨基酸用液相

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  • luxiaoyong

    第2楼2015/06/16


    这是自己胡乱试了一个梯度,效果更差。。。

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  • sukiliang

    第3楼2015/06/16

    你可以试试厂家氨基酸分析包里的流动相

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  • luxiaoyong

    第4楼2015/06/16

    我们的机器是二手的,都不知道有没有这些,一般是附在说明书里的吧?回头找找,谢谢了

    sukiliang(sukiliang) 发表:你可以试试厂家氨基酸分析包里的流动相

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  • sukiliang

    第5楼2015/06/16

    = =!不知道楼主是什么仪器!
    这个不在说明书里!
    找有分析包的厂家要文献吧
    一直都用这分析包来做氨基酸,效果挺不错,就是耗材贵了点

    luxiaoyong(v2979393) 发表: 我们的机器是二手的,都不知道有没有这些,一般是附在说明书里的吧?回头找找,谢谢了

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  • luxiaoyong

    第6楼2015/06/16

    好吧见笑了,我们的仪器是waters最古老的那种,没听说有分析包呢

    sukiliang(sukiliang) 发表: = =!不知道楼主是什么仪器!
    这个不在说明书里!
    找有分析包的厂家要文献吧
    一直都用这分析包来做氨基酸,效果挺不错,就是耗材贵了点

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  • sukiliang

    第7楼2015/06/16

    waters有氨基酸的分析包!
    找他们销售要,之前想用waters的分析包,但是联系他们很久都不搭理,直接用第二个厂家的

    luxiaoyong(v2979393) 发表: 好吧见笑了,我们的仪器是waters最古老的那种,没听说有分析包呢

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  • luxiaoyong

    第8楼2015/06/16

    原来是这样,了解了,多谢多谢!

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  • Aspzz

    第9楼2015/06/16

    氨基酸用那个标准做呀?

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  • cxq19871003

    第10楼2015/06/16

    楼主 针对氨基酸组分的检测:
    ①分离度一般用洗脱程序调节难度系数过大,但其分离度一般同流动相酸度、
    柱温箱温度关系较大;
    ②目前,氨基酸组分的检测主要采用的是HPLC柱前衍生法检测,效果不错,
    可同时检测多种(可达20多种)组分;
    ③看楼主给出的图谱,貌似使用液质检测吧,若使用液质,不衍生可直接检
    测氨基酸组分,即可定量、定性,其实不用太在乎分离度,关键是总离子
    谱图在选择离子谱图提取时,提取出的谱图能够分析,便于定量、定性即可。

    luxiaoyong(v2979393) 发表:在下现在在优化液相条件,用流动相为A:10mM甲酸铵水溶液,加0.1%甲酸;B:甲醇:水(95:5),加2mM甲酸铵和0.1%甲酸,测10种氨基酸的混标,试了很多种梯度都不能把样品很好地分开,而且峰形也很差,如图所示是其中一个梯度,实验室师姐之前用过的,我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循,感激不尽!

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