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求助,关于葡糖酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶

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  • 求助,我不太懂酶单位活性计算,我们需要30U/ml的溶液,之前买了2ml装的b-葡糖酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶,使用时要不要稀释?
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  • vcningmeng

    第1楼2015/06/24

    我会让我们负责这方面的产品专员过来解释一下

    Chem李(v2725311) 发表:求助,我不太懂酶单位活性计算,我们需要30U/ml的溶液,之前买了2ml装的b-葡糖酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶,使用时要不要稀释?

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  • CYBB

    第2楼2015/06/25

    Hello Chem, 生物酶的酶活力单位即为U(国际单位是IU,通常还有unit, u等表示形式, "同一种生物酶可能存在不同的酶活力定义和单位), 您提到的30U/ml是酶的比活力(通俗点讲,理解成浓度也是可行的)
    我们每次提到的实验中的酶用量为多少多少,特指就是消耗了多少U,因此,您可以根据实验要求使用量,来移取一定体积使用即可(如果你购买的是比活力300U/mL, 2mL装, 参考方法要求 配制30U/mL,使用1mL参与酶促反应,那么您实验消耗的总酶量=30U/mL*1mL=30U;所以对于比活力为300U/mL的产品来说,您移取0.1mL即可,可以不用稀释)
    对于溶液型的生物酶产品,如需稀释使用的话, 建议选用与本产品同一体系的溶解介质稀释(可以询问厂商), 确保生物酶的最佳活性.
    此外, 生物酶的生物学特性和使用注意细节不仅于此, 需要具体情况具体分析。
    值得分享的是据目前市场了解, β-葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶 不同的厂商使用不同的酶活力单位:U 或 unit,然而其酶活力定义是不同的
    1. CNW, Sigma 的酶活力单位(unit)定义一致
    定义:在 37°C 和 pH 5.0 下,一个 unit(Fisherman) 单位每小时可从酚酞葡萄糖苷酸中释放 1.0 μ g 的酚酞(30 分钟试验)
    2. Merck的酶活力单位(U)定义不同
    定义:在 38°C 和 pH 3.8 下,1 U catalyses the transformation of 1μmole of 4-nitrophenyl-beta-D-glucopyranosiduronic acid per minute
    所以此时 U≠unit, 我们在实际使用中需根据不同标准使用不同用量。
    不清楚Chem您目前参考的是哪个检测标准?

    Chem李(v2725311) 发表:求助,我不太懂酶单位活性计算,我们需要30U/ml的溶液,之前买了2ml装的b-葡糖酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶,使用时要不要稀释?

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  • Chem李

    第3楼2015/06/25

    CYBB(v2655559) 发表:Hello Chem, 生物酶的酶活力单位即为U(国际单位是IU,通常还有unit, u等表示形式, "同一种生物酶可能存在不同的酶活力定义和单位), 您提到的30U/ml是酶的比活力(通俗点讲,理解成浓度也是可行的)
    我们每次提到的实验中的酶用量为多少多少,特指就是消耗了多少U,因此,您可以根据实验要求使用量,来移取一定体积使用即可(如果你购买的是比活力300U/mL, 2mL装, 参考方法要求 配制30U/mL,使用1mL参与酶促反应,那么您实验消耗的总酶量=30U/mL*1mL=30U;所以对于比活力为300U/mL的产品来说,您移取0.1mL即可,可以不用稀释)
    ……………………………………

    不清楚Chem您目前参考的是哪个检测标准?
    我依据的是GB/T 21313-2007,麻烦帮我看下,我究竟要不要稀释,我们买的是CNW的2ml装的酶,上面有<100000unit和>20000unit字样

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  • CYBB

    第4楼2015/06/25

    对于此标准,CNW产品, 建议用量150uL/样品

    Chem李(v2725311) 发表:

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  • 暗夜精灵

    第5楼2015/06/30

    直接稀释不就可以了吗

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