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【讨论】再重温一下免疫亲和柱进行前处理是注意事项

前处理综合讨论

  • 最近，换了普瑞邦的免疫亲和柱，样品净化还挺理想的，不过一些注意事项还是挺重要的，与大家共勉！
    1.第一步 样品提取液过柱流速
    免疫亲和柱抗原抗体结合需要时间，第一步样品提取液过柱时， 流速控制在 1ml/min，
    约为 2-3 秒一滴（可用泵流操作架控制流速—盖上泵流操作架的盖子），抗原抗体结合完
    整度直接影响实验结果。
    2.第二步 免疫亲和柱的冲洗
    （复杂样品）最好以配置好的 PBS 来进行免疫亲和柱的操作第二项，要比水冲洗效果
    更佳， 此步骤可以快速过柱，用加压形式来让过柱液体形成水柱状，达到冲洗目的，去除
    其它一些杂质。
    3.第三步 所需待测液的收集
    加入洗脱所需溶剂后，当溶剂将要低落时用免疫亲和柱底部小堵头来堵住免疫亲和柱下
    端，让洗脱溶剂在免疫亲和柱内温育（侵泡） 30s-1min，如测 M1 无需温育。需使其抗原
    抗体彻底分离后再进行收集。
  • 分
  • 该帖子已被版主-999youran加5积分，加2经验;加分理由:话题
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    +关注 私聊

  • 土老冒豆豆

    第1楼2015/08/17

    应助达人

    分离抗体抗原的？

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    +关注 私聊

  • fanghuangzhe

    第2楼2015/08/22

    这种算生物实验了吧，

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    +关注 私聊

  • hujiangtao

    第3楼2015/08/26

    应助达人

    一般按照说明说来做没问题

0
    +关注 私聊

  • wslmpol

    第4楼2015/08/28

    这个不算生物实验，在检测毒素含量的时候常用。免疫亲和柱的原理是利用待测物与柱床中抗原抗体的结合特性从而与杂质进行分离。

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    +关注 私聊

  • 职业游民

    第5楼2015/11/04

    确切说来是纯化

    土老冒豆豆(土老冒豆豆) 发表:分离抗体抗原的？

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    +关注 私聊

  • 西北风

    第6楼2015/11/11

    应助达人

    谢谢楼主分经验分享，实验室工作经验积累很重要！

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