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SPE 萃取血浆,总是堵. 如何解决?

分离/萃取

  • SPE 规格是 3mL 35mg.
    250uL 的血浆加2mL 缓冲液混匀之后上样. 结果有的SPE柱堵的非常严重. 血浆样品即使加高负压也不能透过SPE柱.
    药物含量很低,不能再减少血浆体积了.
    请问,哪位大侠知道如何解决这个"堵"的问题?
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  • 雾非雾

    第1楼2015/08/28

    应助达人

    血浆属于比较复杂的基底,这个单用SPE柱可能不一定能把杂质除得干净,可以考虑用GPC,就我们用SPE柱的感觉,很可能造成堵的原因是血浆里的物质把上筛板给糊住了,因为不知道您用的是什么SPE柱,不知道能不能扣掉上筛板试试过柱效果(上筛板起来把样液均匀分配的作用,没有上筛板的话,加样要慢点。以免填料被冲开)

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  • cboy

    第2楼2015/09/21

    在SPE柱管里塞点棉花试试

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  • m3308533

    第3楼2017/10/15

    血清哪有直接上柱子的,一般先高速离心然后蛋白沉淀后再高速离心,稀释后上样

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  • 荆棘鸟

    第4楼2017/10/23

    应助达人

    一般操作时加缓冲液然后离心,如果药物和蛋白有结合或者能进入红细胞,可以通过超声波振荡、加乙腈等有机溶剂、硫酸锌-亚铁氰化钾等无机盐,或者酸破坏然后再离心除去蛋白再进行固相萃取操作。

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