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硫酸苯酚-紫外分光光度计测多糖含量的影响因素

m3028242

2015/09/15

紫外可见分光光度计（UV）

问题来源：实验室用10版《中国药典》“玉竹”的多糖含量方法测苦荞麦中的多糖，由于前后两人测得结果差距比较大，A同学结果低、B同学结果高。然后对一系列可能影响结果的因素做了对照试验。

分析原因：两人在实验过程中“测定法”下离心时间分别为A同学：5min和B同学：25min，所以怀疑是离心时间导致结果的不一致。
查找资料：多糖的单糖基越多所带的羟基也就越多多糖的极性也就增大根据相似相溶就是极性的有机物易容于极性的溶剂，极性小的易溶于极性小或非极性溶剂多糖极性较大在水中的溶解性很好不过在醇的溶解性很低所以将醇加到含有多糖的水溶液中可以改变的水溶液的极性极性大的多糖最先溶出来极性下的最后溶出来做到了分级纯化其实这也是浓缩多糖的好方法。糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比。
对照试验：分别对两人的样品做了5min和25min的离心处理，测试结果A同学的样品离心5min的显色很低，离心25min显色深。B同学离心5min和25min显色差距不大都很深。
请问这能说明问题么？

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该帖子已被版主-过年杀只猪加5积分，加2经验;加分理由:话题

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m3028242

第1楼2015/09/15

样品残留的固体杂质（对糖没有影响）会不会对离心，或者离心后弃去乙醇液取沉淀的过程产生影响？或者还有其他的可能与建议？

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m3028242

第2楼2015/09/15

求助有没有可以帮解答的

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小虾米

第3楼2015/09/26

离心时间导致结果的不一致？

如果是这样，那你25min也不一定会离心完全啊

有试过加大离心速度？

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荆棘鸟fiona

第4楼2015/11/03

楼主有试过其他的离心时间吗？
我查找了一个离心15分钟的操作方法：http://bbs.instrument.com.cn/topic/2830867

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该帖子已被版主-过年杀只猪加2积分，加2经验;加分理由:应助

F在路上

第5楼2015/11/03

A童鞋和B童鞋的样品都有差距吧

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暗夜精灵

第6楼2015/11/30

好热心的帮助
荆棘鸟fiona(v2648817) 发表:楼主有试过其他的离心时间吗？
我查找了一个离心15分钟的操作方法：http://bbs.instrument.com.cn/topic/2830867

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