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硫酸苯酚-紫外分光光度计测多糖含量的影响因素

紫外可见分光光度计(UV)

  • 问题来源:实验室用10版《中国药典》“玉竹”的多糖含量方法测苦荞麦中的多糖,由于前后两人测得结果差距比较大,A同学结果低、B同学结果高。然后对一系列可能影响结果的因素做了对照试验。

    分析原因:两人在实验过程中“测定法”下离心时间分别为A同学:5min和B同学:25min,所以怀疑是离心时间导致结果的不一致。
    查找资料: 多糖的单糖基越多 所带的羟基也就越多 多糖的极性也就增大 根据相似相溶 就是 极性的有机物易容于极性的溶剂,极性小的易溶于极性小或非极性溶剂 多糖极性较大 在水中的溶解性很好不过 在醇的溶解性 很低 所以 将 醇 加到含有多糖的水溶液中 可以改变的水溶液的极性 极性大的多糖最先溶出来 极性下的最后溶出来 做到了分级纯化 其实这也是浓缩多糖的好方法。糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比。
    对照试验:分别对两人的样品做了5min和25min的离心处理,测试结果A同学的样品离心5min的显色很低,离心25min显色深。B同学离心5min和25min显色差距不大都很深。
    请问这 能说明问题么?
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  • m3028242

    第1楼2015/09/15

    样品残留的固体杂质(对糖没有影响)会不会对离心,或者离心后弃去乙醇液取沉淀的过程产生影响?或者还有其他的可能与建议?

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  • m3028242

    第2楼2015/09/15

    求助 有没有可以帮解答的

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  • 小虾米

    第3楼2015/09/26

    离心时间导致结果的不一致?

    如果是这样,那你25min也不一定会离心完全啊

    有试过加大离心速度?

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  • F在路上

    第5楼2015/11/03

    A童鞋和B童鞋的样品都有差距吧

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